植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2013年
1期
82-87
,共6页
杨秀荣%田涛%孙淑琴%刘亦学
楊秀榮%田濤%孫淑琴%劉亦學
양수영%전도%손숙금%류역학
Bacillus subtilis B579%绿色荧光蛋白%黄瓜根部%定殖
Bacillus subtilis B579%綠色熒光蛋白%黃瓜根部%定殖
Bacillus subtilis B579%록색형광단백%황과근부%정식
利用绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)标记靶标微生物是目前研究微生物和宿主互作的重要手段.在本研究中,作者用电击转化的方法将携带质粒gfpmut3a基因的穿梭载体pGFP4412导人生防枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B579中,并得到成功表达GFP的枯草芽孢杆菌B579-gfp.用抗生素平板回收结合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察对枯草芽孢杆菌B579-gfp在盆栽的黄瓜根表定殖情况进行了研究,结果表明:标记菌株在激发光波长为488 nm的蓝光下可观察到亮绿色的荧光；B579-gfp菌体能够定殖在黄瓜根部,在根基部和中部都有菌体聚集而形成膜状结构,在根的分叉和根冠处可观察到大量B579-gfp定殖；浸种、蘸根以及灌根接种均可回收到大量的B579-gfp,分别为4.0×103、1.0×104和2.0×102 cfu/g.
利用綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)標記靶標微生物是目前研究微生物和宿主互作的重要手段.在本研究中,作者用電擊轉化的方法將攜帶質粒gfpmut3a基因的穿梭載體pGFP4412導人生防枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)B579中,併得到成功錶達GFP的枯草芽孢桿菌B579-gfp.用抗生素平闆迴收結閤激光掃描共聚焦顯微鏡(LSCM)觀察對枯草芽孢桿菌B579-gfp在盆栽的黃瓜根錶定殖情況進行瞭研究,結果錶明:標記菌株在激髮光波長為488 nm的藍光下可觀察到亮綠色的熒光；B579-gfp菌體能夠定殖在黃瓜根部,在根基部和中部都有菌體聚集而形成膜狀結構,在根的分扠和根冠處可觀察到大量B579-gfp定殖；浸種、蘸根以及灌根接種均可迴收到大量的B579-gfp,分彆為4.0×103、1.0×104和2.0×102 cfu/g.
이용록색형광단백(Green fluorescent protein,GFP)표기파표미생물시목전연구미생물화숙주호작적중요수단.재본연구중,작자용전격전화적방법장휴대질립gfpmut3a기인적천사재체pGFP4412도인생방고초아포간균(Bacillus subtilis)B579중,병득도성공표체GFP적고초아포간균B579-gfp.용항생소평판회수결합격광소묘공취초현미경(LSCM)관찰대고초아포간균B579-gfp재분재적황과근표정식정황진행료연구,결과표명:표기균주재격발광파장위488 nm적람광하가관찰도량록색적형광；B579-gfp균체능구정식재황과근부,재근기부화중부도유균체취집이형성막상결구,재근적분차화근관처가관찰도대량B579-gfp정식；침충、잠근이급관근접충균가회수도대량적B579-gfp,분별위4.0×103、1.0×104화2.0×102 cfu/g.
