CAJ | 학술논문

目的:探讨小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制缺氧诱导因子(hyposia-inducible factor 2α,HIF-2α)基因表达对人肺腺癌A549细胞株侵袭转移的影响.方法:构建针对HIF-2α-siRNA并转柒A549细胞株,采用实时荧光定量多聚酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blot方法检测HIF-2α表达水平,通过Transwell试验及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白检测,探讨HIF-2α-siRNA对A549细胞侵袭力的影响.结果:将HIF-2α-siRNA转染A549细胞后,HIF-2α的mRNA和蛋白表达水平均下调.qRT PCR检测显示,第4号siRNA表达载体抑制作用最强,转染后24 h和48h对HIF-2α基因mRNA表达水平抑制率分别为(60.63±5.10)％和(80.00±3.55)％.Western blot检测同样证实,第4号siRNA表达载体对于HIF-2α蛋白表达抑制作用最强,转染后24 h和48 h抑制率分别为(31.69±11.56)％和(82.87±4.09)％.Transwell试验发现,转染HIF-2α-siRNA后,穿膜细胞数显著减少(P＜0.05),表明细胞侵袭力下降.转染HIF-2α siRNA后,VEGF表达水平显著下调(P＜0.01).结论:转染HIF 2α-siRNA可有效降低A549细胞的侵袭转移力.
목적:탐토소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)억제결양유도인자(hyposia-inducible factor 2α,HIF-2α)기인표체대인폐선암A549세포주침습전이적영향.방법:구건침대HIF-2α-siRNA병전칠A549세포주,채용실시형광정량다취매련반응(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)화Western blot방법검측HIF-2α표체수평,통과Transwell시험급혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)단백검측,탐토HIF-2α-siRNA대A549세포침습력적영향.결과:장HIF-2α-siRNA전염A549세포후,HIF-2α적mRNA화단백표체수평균하조.qRT PCR검측현시,제4호siRNA표체재체억제작용최강,전염후24 h화48h대HIF-2α기인mRNA표체수평억제솔분별위(60.63±5.10)％화(80.00±3.55)％.Western blot검측동양증실,제4호siRNA표체재체대우HIF-2α단백표체억제작용최강,전염후24 h화48 h억제솔분별위(31.69±11.56)％화(82.87±4.09)％.Transwell시험발현,전염HIF-2α-siRNA후,천막세포수현저감소(P＜0.05),표명세포침습력하강.전염HIF-2α siRNA후,VEGF표체수평현저하조(P＜0.01).결론:전염HIF 2α-siRNA가유효강저A549세포적침습전이력.