兰州大学学报（医学版）
蘭州大學學報（醫學版）
란주대학학보（의학판）
JOURNAL OF LANZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2012年
3期
17-22,26
,共7页
李坤雨%李牛%王群%张壮壮%韩泽广%邓庆
李坤雨%李牛%王群%張壯壯%韓澤廣%鄧慶
리곤우%리우%왕군%장장장%한택엄%산경
RNA干扰%四跨膜蛋白%肝癌%细胞周期
RNA榦擾%四跨膜蛋白%肝癌%細胞週期
RNA간우%사과막단백%간암%세포주기
目的 研究跨膜蛋白35(TMEM35)基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性.方法 利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白的二级结构进行分析；利用实时定量多聚酶链反应技术检测TMEM35基因在肝癌患者癌组织及相应癌旁组织中的表达情况；采用化学合成干扰小RNA片段(siRNA)干扰TMEM35基因在肝癌细胞MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,通过软琼脂克隆形成实验观察肝癌细胞非贴壁依赖性克隆生长情况,流式细胞术分析细胞周期；通过蛋白功能相互作用网络数据库STRING推测TMEM35蛋白发挥相应功能的搭档基因.结果 TMEM35为具有4个跨膜结构域的四跨膜蛋白,实时定量多聚酶链反应检测发现TMEM35基因在肝癌中表达紊乱,其中与相应癌旁组织相比较,TMEM35在14例癌组织中表达显著上调,在20例癌组织中表达显著下调(P＜0.05).针对TMEM35基因设计合成siRNAs能够特异性沉默TMEM35基因在肝癌细胞株MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,并且肝癌细胞在软琼脂培养条件下,形成的克隆显著减少.流式细胞术分析发现干扰TMEM35基因表达,能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G1期增多,S期减少.结论 TMEM35基因编码具有四跨膜结构域的膜蛋白,在肝癌细胞生长中发挥重要作用.
目的 研究跨膜蛋白35(TMEM35)基因在肝癌細胞生長、細胞週期中的作用,探討跨膜蛋白TMEM35作為潛在肝癌治療靶點的可行性.方法 利用跨膜蛋白二級結構預測工具SPLIT對TMEM35蛋白的二級結構進行分析；利用實時定量多聚酶鏈反應技術檢測TMEM35基因在肝癌患者癌組織及相應癌徬組織中的錶達情況；採用化學閤成榦擾小RNA片段(siRNA)榦擾TMEM35基因在肝癌細胞MHCC-97H、MHCC-97L中的錶達,通過軟瓊脂剋隆形成實驗觀察肝癌細胞非貼壁依賴性剋隆生長情況,流式細胞術分析細胞週期；通過蛋白功能相互作用網絡數據庫STRING推測TMEM35蛋白髮揮相應功能的搭檔基因.結果 TMEM35為具有4箇跨膜結構域的四跨膜蛋白,實時定量多聚酶鏈反應檢測髮現TMEM35基因在肝癌中錶達紊亂,其中與相應癌徬組織相比較,TMEM35在14例癌組織中錶達顯著上調,在20例癌組織中錶達顯著下調(P＜0.05).針對TMEM35基因設計閤成siRNAs能夠特異性沉默TMEM35基因在肝癌細胞株MHCC-97H、MHCC-97L中的錶達,併且肝癌細胞在軟瓊脂培養條件下,形成的剋隆顯著減少.流式細胞術分析髮現榦擾TMEM35基因錶達,能夠減緩細胞週期進展,錶現為細胞G1期增多,S期減少.結論 TMEM35基因編碼具有四跨膜結構域的膜蛋白,在肝癌細胞生長中髮揮重要作用.
목적 연구과막단백35(TMEM35)기인재간암세포생장、세포주기중적작용,탐토과막단백TMEM35작위잠재간암치료파점적가행성.방법 이용과막단백이급결구예측공구SPLIT대TMEM35단백적이급결구진행분석；이용실시정량다취매련반응기술검측TMEM35기인재간암환자암조직급상응암방조직중적표체정황；채용화학합성간우소RNA편단(siRNA)간우TMEM35기인재간암세포MHCC-97H、MHCC-97L중적표체,통과연경지극륭형성실험관찰간암세포비첩벽의뢰성극륭생장정황,류식세포술분석세포주기；통과단백공능상호작용망락수거고STRING추측TMEM35단백발휘상응공능적탑당기인.결과 TMEM35위구유4개과막결구역적사과막단백,실시정량다취매련반응검측발현TMEM35기인재간암중표체문란,기중여상응암방조직상비교,TMEM35재14례암조직중표체현저상조,재20례암조직중표체현저하조(P＜0.05).침대TMEM35기인설계합성siRNAs능구특이성침묵TMEM35기인재간암세포주MHCC-97H、MHCC-97L중적표체,병차간암세포재연경지배양조건하,형성적극륭현저감소.류식세포술분석발현간우TMEM35기인표체,능구감완세포주기진전,표현위세포G1기증다,S기감소.결론 TMEM35기인편마구유사과막결구역적막단백,재간암세포생장중발휘중요작용.
