中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2013年
4期
9-11,14,中插1
,共5页
唐元凤%李方正%张莉平%周婧%曲洪磊%张文平%宋学雄
唐元鳳%李方正%張莉平%週婧%麯洪磊%張文平%宋學雄
당원봉%리방정%장리평%주청%곡홍뢰%장문평%송학웅
抗乙脑病毒载体%猪胎儿成纤维细胞%脂质体%转染
抗乙腦病毒載體%豬胎兒成纖維細胞%脂質體%轉染
항을뇌병독재체%저태인성섬유세포%지질체%전염
本试验旨在探索脂质体Lipofectamine TM2000介导抗猪乙脑病毒(Anti-JEV)载体转染猪胎儿成纤维细胞(PFF)的最适条件,为构建Anti-JEV转基因胚胎提供供核细胞.从妊娠大白母猪获取10～15 cm猪胎儿,采集背部皮肤用于组织块法培养分离PFF.结果显示,细胞培养至P7代,生长曲线正常；P5-7代细胞用于抗猪乙脑病毒载体转染,当质粒DNA量设定为0.35、0.7、1.05 μg和1.4 μg时,转染率分别为12.75％、36.82％、24.12％和8.85％；当脂质体量设定为0.7、1.4、2.1、2.8 μL和3.5 μL时,转染率分别为13.08％、21.71％、37.15％、24.21％和9.21％；当转染时间设定为2.5、4.5、6.5h和8.5h时,转染率分别为3.97％、38.48％、17.54％和12.47％.这些结果表明,2.1μL脂质体介导0.7 μg质粒DNA转染4.5h转染效率最高.
本試驗旨在探索脂質體Lipofectamine TM2000介導抗豬乙腦病毒(Anti-JEV)載體轉染豬胎兒成纖維細胞(PFF)的最適條件,為構建Anti-JEV轉基因胚胎提供供覈細胞.從妊娠大白母豬穫取10～15 cm豬胎兒,採集揹部皮膚用于組織塊法培養分離PFF.結果顯示,細胞培養至P7代,生長麯線正常；P5-7代細胞用于抗豬乙腦病毒載體轉染,噹質粒DNA量設定為0.35、0.7、1.05 μg和1.4 μg時,轉染率分彆為12.75％、36.82％、24.12％和8.85％；噹脂質體量設定為0.7、1.4、2.1、2.8 μL和3.5 μL時,轉染率分彆為13.08％、21.71％、37.15％、24.21％和9.21％；噹轉染時間設定為2.5、4.5、6.5h和8.5h時,轉染率分彆為3.97％、38.48％、17.54％和12.47％.這些結果錶明,2.1μL脂質體介導0.7 μg質粒DNA轉染4.5h轉染效率最高.
본시험지재탐색지질체Lipofectamine TM2000개도항저을뇌병독(Anti-JEV)재체전염저태인성섬유세포(PFF)적최괄조건,위구건Anti-JEV전기인배태제공공핵세포.종임신대백모저획취10～15 cm저태인,채집배부피부용우조직괴법배양분리PFF.결과현시,세포배양지P7대,생장곡선정상；P5-7대세포용우항저을뇌병독재체전염,당질립DNA량설정위0.35、0.7、1.05 μg화1.4 μg시,전염솔분별위12.75％、36.82％、24.12％화8.85％；당지질체량설정위0.7、1.4、2.1、2.8 μL화3.5 μL시,전염솔분별위13.08％、21.71％、37.15％、24.21％화9.21％；당전염시간설정위2.5、4.5、6.5h화8.5h시,전염솔분별위3.97％、38.48％、17.54％화12.47％.저사결과표명,2.1μL지질체개도0.7 μg질립DNA전염4.5h전염효솔최고.
