天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2013年
1期
5-8,后插1
,共5页
肝肿瘤%细胞系,肿瘤%质粒%逆转录聚合酶链反应%印迹法,蛋白质%细胞凋亡%XPD基因%ERG基因
肝腫瘤%細胞繫,腫瘤%質粒%逆轉錄聚閤酶鏈反應%印跡法,蛋白質%細胞凋亡%XPD基因%ERG基因
간종류%세포계,종류%질립%역전록취합매련반응%인적법,단백질%세포조망%XPD기인%ERG기인
目的 探讨人剪切修复基因XPD转染人肝癌细胞SMMC-7721后对细胞自身生长及癌基因ERG表达的影响.方法 将XPD基因通过LipofectamineTM 2000转染人人肝癌细胞SMMC-7721.实验分为4组,分别为重组质粒转染细胞SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD组(XPD组)、空载质粒转染细胞SMMC-7721-pEGFP-N2组(N2组)、脂质体转染细胞SMMC-7721组(脂质体组)、肝癌细胞SMMC-7721无转染空白对照组(空白对照组).分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westem blot法检测各组细胞中XPD、ERG的mRNA和蛋白质的表达量,用四甲基偶氮唑盐比色法(MT)检测各组细胞的增殖活力及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况.结果 与其他3组比较,XPD组中的ERG mRNA及蛋白表达量显著降低,而XPD mRNA及蛋白表达量明显升高(P＜0.01).转染了XPD的肝癌细胞SMMC-7721,其细胞增殖活性(0.455±0.009)显著降低,细胞凋亡率(42.06±0.01)％明显升高(P＜ 0.001).结论 XPD基因可以抑制癌基因ERG的表达,明显降低肝癌细胞的增殖活力并提高肝癌细胞的凋亡率.
目的 探討人剪切脩複基因XPD轉染人肝癌細胞SMMC-7721後對細胞自身生長及癌基因ERG錶達的影響.方法 將XPD基因通過LipofectamineTM 2000轉染人人肝癌細胞SMMC-7721.實驗分為4組,分彆為重組質粒轉染細胞SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD組(XPD組)、空載質粒轉染細胞SMMC-7721-pEGFP-N2組(N2組)、脂質體轉染細胞SMMC-7721組(脂質體組)、肝癌細胞SMMC-7721無轉染空白對照組(空白對照組).分彆用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Westem blot法檢測各組細胞中XPD、ERG的mRNA和蛋白質的錶達量,用四甲基偶氮唑鹽比色法(MT)檢測各組細胞的增殖活力及流式細胞儀檢測各組細胞的凋亡情況.結果 與其他3組比較,XPD組中的ERG mRNA及蛋白錶達量顯著降低,而XPD mRNA及蛋白錶達量明顯升高(P＜0.01).轉染瞭XPD的肝癌細胞SMMC-7721,其細胞增殖活性(0.455±0.009)顯著降低,細胞凋亡率(42.06±0.01)％明顯升高(P＜ 0.001).結論 XPD基因可以抑製癌基因ERG的錶達,明顯降低肝癌細胞的增殖活力併提高肝癌細胞的凋亡率.
목적 탐토인전절수복기인XPD전염인간암세포SMMC-7721후대세포자신생장급암기인ERG표체적영향.방법 장XPD기인통과LipofectamineTM 2000전염인인간암세포SMMC-7721.실험분위4조,분별위중조질립전염세포SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD조(XPD조)、공재질립전염세포SMMC-7721-pEGFP-N2조(N2조)、지질체전염세포SMMC-7721조(지질체조)、간암세포SMMC-7721무전염공백대조조(공백대조조).분별용역전록취합매련반응(RT-PCR)화Westem blot법검측각조세포중XPD、ERG적mRNA화단백질적표체량,용사갑기우담서염비색법(MT)검측각조세포적증식활력급류식세포의검측각조세포적조망정황.결과 여기타3조비교,XPD조중적ERG mRNA급단백표체량현저강저,이XPD mRNA급단백표체량명현승고(P＜0.01).전염료XPD적간암세포SMMC-7721,기세포증식활성(0.455±0.009)현저강저,세포조망솔(42.06±0.01)％명현승고(P＜ 0.001).결론 XPD기인가이억제암기인ERG적표체,명현강저간암세포적증식활력병제고간암세포적조망솔.
