南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
1期
86-92
,共7页
陈劲松%张波%潘从泽%任磊%陈韵岱
陳勁鬆%張波%潘從澤%任磊%陳韻岱
진경송%장파%반종택%임뢰%진운대
单核细胞趋化因子-3%内皮细胞%粘附分子%组织因子%凋亡
單覈細胞趨化因子-3%內皮細胞%粘附分子%組織因子%凋亡
단핵세포추화인자-3%내피세포%점부분자%조직인자%조망
目的 研究单核细胞趋化因子-3(MCP-3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达ICAM-1、VCAM-1、TF、TFPI及其凋亡的影响.方法 分离、培养人脐静脉内皮细胞,分别给予0～3.0 ng/ml的MCP-3进行干预,确定MCP-3对HUVECs的最适作用浓度,以此浓度干预HUVECs,在MCP-3加药之前1h分别给予MCP-3抗体(20 ng/ml)、PI3K抑制剂LY-294002(5 mmol/ml)处理细胞,MCP-3作用24 h后提取各组总RNA、总蛋白,用RT-PCR、Western blot分别检测干预后的ICAM-1、VCAM-1 、TF、TFPI的表达.模拟病理状态,用ox-LDL干预HUVECs与空白组对照,24 h后提取各组总RNA、总蛋白,用RT-PCR、Western Blot分别检测各组MCP-3表达情况.最后,用MCP-3及MCP-3+CCR2拮抗剂RS102895 (6μmol/L)分别干预HUVECs,作用24、48 h分别检测HUVECs凋亡率及caspase3的表达,并与空白对照组比较.结果 MCP-3对HUVECs的最适作用浓度为0.3 ng/ml (P＜0.05)；MCP-3可诱导HUVECs细胞中ICAM-1、VCAM-1、TF表达的增加,同时可抑制TFPI表达(P＜0.05);MCP-3抗体和LY-294002可分别拮抗、抑制此作用(P＜0.05)；ox-LDL可上调HUVECs表达MCP-3 (P＜0.05)；作用24、48 h后MCP-3可明显诱导HUVECs凋亡,CCR2抑制剂可拮抗此作用.结论 ox-LDL可诱导HUVECs表达MCP-3,MCP-3可诱导HUVECs凋亡,且可能部分通过PI3K信号通路影响HUVECs功能.
目的 研究單覈細胞趨化因子-3(MCP-3)對人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)錶達ICAM-1、VCAM-1、TF、TFPI及其凋亡的影響.方法 分離、培養人臍靜脈內皮細胞,分彆給予0～3.0 ng/ml的MCP-3進行榦預,確定MCP-3對HUVECs的最適作用濃度,以此濃度榦預HUVECs,在MCP-3加藥之前1h分彆給予MCP-3抗體(20 ng/ml)、PI3K抑製劑LY-294002(5 mmol/ml)處理細胞,MCP-3作用24 h後提取各組總RNA、總蛋白,用RT-PCR、Western blot分彆檢測榦預後的ICAM-1、VCAM-1 、TF、TFPI的錶達.模擬病理狀態,用ox-LDL榦預HUVECs與空白組對照,24 h後提取各組總RNA、總蛋白,用RT-PCR、Western Blot分彆檢測各組MCP-3錶達情況.最後,用MCP-3及MCP-3+CCR2拮抗劑RS102895 (6μmol/L)分彆榦預HUVECs,作用24、48 h分彆檢測HUVECs凋亡率及caspase3的錶達,併與空白對照組比較.結果 MCP-3對HUVECs的最適作用濃度為0.3 ng/ml (P＜0.05)；MCP-3可誘導HUVECs細胞中ICAM-1、VCAM-1、TF錶達的增加,同時可抑製TFPI錶達(P＜0.05);MCP-3抗體和LY-294002可分彆拮抗、抑製此作用(P＜0.05)；ox-LDL可上調HUVECs錶達MCP-3 (P＜0.05)；作用24、48 h後MCP-3可明顯誘導HUVECs凋亡,CCR2抑製劑可拮抗此作用.結論 ox-LDL可誘導HUVECs錶達MCP-3,MCP-3可誘導HUVECs凋亡,且可能部分通過PI3K信號通路影響HUVECs功能.
목적 연구단핵세포추화인자-3(MCP-3)대인제정맥내피세포(HUVECs)표체ICAM-1、VCAM-1、TF、TFPI급기조망적영향.방법 분리、배양인제정맥내피세포,분별급여0～3.0 ng/ml적MCP-3진행간예,학정MCP-3대HUVECs적최괄작용농도,이차농도간예HUVECs,재MCP-3가약지전1h분별급여MCP-3항체(20 ng/ml)、PI3K억제제LY-294002(5 mmol/ml)처리세포,MCP-3작용24 h후제취각조총RNA、총단백,용RT-PCR、Western blot분별검측간예후적ICAM-1、VCAM-1 、TF、TFPI적표체.모의병리상태,용ox-LDL간예HUVECs여공백조대조,24 h후제취각조총RNA、총단백,용RT-PCR、Western Blot분별검측각조MCP-3표체정황.최후,용MCP-3급MCP-3+CCR2길항제RS102895 (6μmol/L)분별간예HUVECs,작용24、48 h분별검측HUVECs조망솔급caspase3적표체,병여공백대조조비교.결과 MCP-3대HUVECs적최괄작용농도위0.3 ng/ml (P＜0.05)；MCP-3가유도HUVECs세포중ICAM-1、VCAM-1、TF표체적증가,동시가억제TFPI표체(P＜0.05);MCP-3항체화LY-294002가분별길항、억제차작용(P＜0.05)；ox-LDL가상조HUVECs표체MCP-3 (P＜0.05)；작용24、48 h후MCP-3가명현유도HUVECs조망,CCR2억제제가길항차작용.결론 ox-LDL가유도HUVECs표체MCP-3,MCP-3가유도HUVECs조망,차가능부분통과PI3K신호통로영향HUVECs공능.
