安徽科技学院学报
安徽科技學院學報
안휘과기학원학보
JOURNAL OF ANHUI SCIENCE AND TECHNOLOGY UNIVERSITY
2013年
1期
49-53
,共5页
徐海强%高贵珍%张兴桃%桑维维%张安文
徐海彊%高貴珍%張興桃%桑維維%張安文
서해강%고귀진%장흥도%상유유%장안문
辣椒%SRAP%反应体系%优化%引物筛选
辣椒%SRAP%反應體繫%優化%引物篩選
랄초%SRAP%반응체계%우화%인물사선
本研究以辣椒基因组DNA为模板,优化辣椒SRAP反应体系中的参数,建立了一套适用于辣椒的SRAP-PCR最佳反应体系.在25 μL反应体系中,模板DNA 50 ng、上下游引物各0.1nol/L、dNTPs 0.1mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5U、Mg2+浓度为2.0 mmol/L.扩增程序为:94℃3 min;94℃30 s、35℃30 s、72℃1.5 min,5 cycles；94℃30 s、54℃ 30 s、72℃30 s,35 cycles；72℃10 min,用2％琼脂糖凝胶电泳和8％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增结果.利用该优化体系筛选引物,筛选出条带清晰、重复性好的15对SRAP引物组合,验证了体系的实用性.
本研究以辣椒基因組DNA為模闆,優化辣椒SRAP反應體繫中的參數,建立瞭一套適用于辣椒的SRAP-PCR最佳反應體繫.在25 μL反應體繫中,模闆DNA 50 ng、上下遊引物各0.1nol/L、dNTPs 0.1mmol/L、Taq DNA聚閤酶1.5U、Mg2+濃度為2.0 mmol/L.擴增程序為:94℃3 min;94℃30 s、35℃30 s、72℃1.5 min,5 cycles；94℃30 s、54℃ 30 s、72℃30 s,35 cycles；72℃10 min,用2％瓊脂糖凝膠電泳和8％非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測擴增結果.利用該優化體繫篩選引物,篩選齣條帶清晰、重複性好的15對SRAP引物組閤,驗證瞭體繫的實用性.
본연구이랄초기인조DNA위모판,우화랄초SRAP반응체계중적삼수,건립료일투괄용우랄초적SRAP-PCR최가반응체계.재25 μL반응체계중,모판DNA 50 ng、상하유인물각0.1nol/L、dNTPs 0.1mmol/L、Taq DNA취합매1.5U、Mg2+농도위2.0 mmol/L.확증정서위:94℃3 min;94℃30 s、35℃30 s、72℃1.5 min,5 cycles；94℃30 s、54℃ 30 s、72℃30 s,35 cycles；72℃10 min,용2％경지당응효전영화8％비변성취병희선알응효전영검측확증결과.이용해우화체계사선인물,사선출조대청석、중복성호적15대SRAP인물조합,험증료체계적실용성.
