实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2013年
4期
395-399
,共5页
吕恒%张锦海%陈凤娟%顾海涛%王平%王玉邦%王长军
呂恆%張錦海%陳鳳娟%顧海濤%王平%王玉邦%王長軍
려항%장금해%진봉연%고해도%왕평%왕옥방%왕장군
SARS病毒%可视化检测%环介导等温扩增(LAMP)%钙黄绿素
SARS病毒%可視化檢測%環介導等溫擴增(LAMP)%鈣黃綠素
SARS병독%가시화검측%배개도등온확증(LAMP)%개황록소
目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立SARS冠状病毒可视化快速检测方法.方法 针对SARS冠状病毒RNA聚合酶编码基因保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入钙黄绿素作为LAMP扩增反应指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据钙黄绿素的颜色变化进行结果判定,评价所建立LAMP方法的特异性和灵敏性.结果 本方法最低检出限约为10拷贝/反应管,高于普通PCR;检测特异性高,仅SARS冠状病毒反应管钙黄绿素颜色由褐色变为黄绿色,而甲型H1N1病毒、高致病性H5亚型禽流感病毒、普通流感病毒均不发生变色反应；体系的扩增效率高于普通PCR,35 min内出结果.结论 所建立的基于颜色判定的SARS病毒检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于SARS冠状病毒现场快速检测.
目的 應用環介導等溫擴增(LAMP)技術建立SARS冠狀病毒可視化快速檢測方法.方法 針對SARS冠狀病毒RNA聚閤酶編碼基因保守區設計LAMP引物及環引物,反應體繫加入鈣黃綠素作為LAMP擴增反應指示劑,結閤LAMP濁度儀優化擴增條件,根據鈣黃綠素的顏色變化進行結果判定,評價所建立LAMP方法的特異性和靈敏性.結果 本方法最低檢齣限約為10拷貝/反應管,高于普通PCR;檢測特異性高,僅SARS冠狀病毒反應管鈣黃綠素顏色由褐色變為黃綠色,而甲型H1N1病毒、高緻病性H5亞型禽流感病毒、普通流感病毒均不髮生變色反應；體繫的擴增效率高于普通PCR,35 min內齣結果.結論 所建立的基于顏色判定的SARS病毒檢測方法具有特異、靈敏、設備要求簡單等特點,適用于SARS冠狀病毒現場快速檢測.
목적 응용배개도등온확증(LAMP)기술건립SARS관상병독가시화쾌속검측방법.방법 침대SARS관상병독RNA취합매편마기인보수구설계LAMP인물급배인물,반응체계가입개황록소작위LAMP확증반응지시제,결합LAMP탁도의우화확증조건,근거개황록소적안색변화진행결과판정,평개소건립LAMP방법적특이성화령민성.결과 본방법최저검출한약위10고패/반응관,고우보통PCR;검측특이성고,부SARS관상병독반응관개황록소안색유갈색변위황록색,이갑형H1N1병독、고치병성H5아형금류감병독、보통류감병독균불발생변색반응；체계적확증효솔고우보통PCR,35 min내출결과.결론 소건립적기우안색판정적SARS병독검측방법구유특이、령민、설비요구간단등특점,괄용우SARS관상병독현장쾌속검측.
