中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2012年
22期
7250-7254
,共5页
葡萄膜炎%自身免疫%辅助性T细胞%视网膜S抗原%酶联免疫斑点技术
葡萄膜炎%自身免疫%輔助性T細胞%視網膜S抗原%酶聯免疫斑點技術
포도막염%자신면역%보조성T세포%시망막S항원%매련면역반점기술
目的 联合酶联免疫斑点法(ELISPOT)及酶联免疫吸附实验(ELISA)检测葡萄膜炎患者外周血视网膜S抗原(S-Ag)特异性IFN-γ分泌T淋巴细胞,探讨S-Ag介导的细胞免疫反应是否参与了人葡萄膜炎炎症发展过程.方法 选取活动期葡萄膜炎患者23例作为研究对象,以14例健康志愿者作为正常对照,采集受试者肘静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC).提取、纯化牛S-Ag,以牛S-Ag作为刺激剂与PBMCs共培养,以不加抗原作为阴性对照,以加anti-CD3单克隆抗体作为阳性对照.应用ELISPOT法检测IFN-γ分泌细胞的数量以鉴定T细胞对S-Ag的反应性,同时确定S-Ag特异性Th1细胞的频率;应用ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ的水平,从整体水平检测Th1型免疫反应.结果 60.9%(14例)的葡萄膜炎患者的PBMCs对S-Ag的刺激产生免疫反应,S-Ag特异性Th1细胞的频率为7.4±4.7 SFC/2×105 PBMCs.阴性对照组均未见阳性细胞染色,阳性对照中,对S-Ag有反应患者和对S-Ag无反应患者的IFN-γ分泌细胞数量相同,但较正常人均显著增多(P=0.006,P=0.004).细胞培养上清中检测到不同程度的IFN-γ表达,与阴性对照相比,对S-Ag有反应患者IFN-γ表达量显著增高(P=0.018),对S-Ag无反应患者及正常人表达量无明显变化.阳性对照中,对S-Ag有反应患者和对S-Ag无反应患者IFN-γ分泌量相同,但较正常人均增多(P=0.013,P=0.036).结论 大部分葡萄膜炎患者体内存在S-Ag特异性T细胞,这群细胞介导的Th1型免疫反应在葡萄膜炎发生、复发过程中发挥重要作用.
目的 聯閤酶聯免疫斑點法(ELISPOT)及酶聯免疫吸附實驗(ELISA)檢測葡萄膜炎患者外週血視網膜S抗原(S-Ag)特異性IFN-γ分泌T淋巴細胞,探討S-Ag介導的細胞免疫反應是否參與瞭人葡萄膜炎炎癥髮展過程.方法 選取活動期葡萄膜炎患者23例作為研究對象,以14例健康誌願者作為正常對照,採集受試者肘靜脈血,分離外週血單箇覈細胞(PBMC).提取、純化牛S-Ag,以牛S-Ag作為刺激劑與PBMCs共培養,以不加抗原作為陰性對照,以加anti-CD3單剋隆抗體作為暘性對照.應用ELISPOT法檢測IFN-γ分泌細胞的數量以鑒定T細胞對S-Ag的反應性,同時確定S-Ag特異性Th1細胞的頻率;應用ELISA法檢測細胞培養上清中IFN-γ的水平,從整體水平檢測Th1型免疫反應.結果 60.9%(14例)的葡萄膜炎患者的PBMCs對S-Ag的刺激產生免疫反應,S-Ag特異性Th1細胞的頻率為7.4±4.7 SFC/2×105 PBMCs.陰性對照組均未見暘性細胞染色,暘性對照中,對S-Ag有反應患者和對S-Ag無反應患者的IFN-γ分泌細胞數量相同,但較正常人均顯著增多(P=0.006,P=0.004).細胞培養上清中檢測到不同程度的IFN-γ錶達,與陰性對照相比,對S-Ag有反應患者IFN-γ錶達量顯著增高(P=0.018),對S-Ag無反應患者及正常人錶達量無明顯變化.暘性對照中,對S-Ag有反應患者和對S-Ag無反應患者IFN-γ分泌量相同,但較正常人均增多(P=0.013,P=0.036).結論 大部分葡萄膜炎患者體內存在S-Ag特異性T細胞,這群細胞介導的Th1型免疫反應在葡萄膜炎髮生、複髮過程中髮揮重要作用.
목적 연합매련면역반점법(ELISPOT)급매련면역흡부실험(ELISA)검측포도막염환자외주혈시망막S항원(S-Ag)특이성IFN-γ분비T림파세포,탐토S-Ag개도적세포면역반응시부삼여료인포도막염염증발전과정.방법 선취활동기포도막염환자23례작위연구대상,이14례건강지원자작위정상대조,채집수시자주정맥혈,분리외주혈단개핵세포(PBMC).제취、순화우S-Ag,이우S-Ag작위자격제여PBMCs공배양,이불가항원작위음성대조,이가anti-CD3단극륭항체작위양성대조.응용ELISPOT법검측IFN-γ분비세포적수량이감정T세포대S-Ag적반응성,동시학정S-Ag특이성Th1세포적빈솔;응용ELISA법검측세포배양상청중IFN-γ적수평,종정체수평검측Th1형면역반응.결과 60.9%(14례)적포도막염환자적PBMCs대S-Ag적자격산생면역반응,S-Ag특이성Th1세포적빈솔위7.4±4.7 SFC/2×105 PBMCs.음성대조조균미견양성세포염색,양성대조중,대S-Ag유반응환자화대S-Ag무반응환자적IFN-γ분비세포수량상동,단교정상인균현저증다(P=0.006,P=0.004).세포배양상청중검측도불동정도적IFN-γ표체,여음성대조상비,대S-Ag유반응환자IFN-γ표체량현저증고(P=0.018),대S-Ag무반응환자급정상인표체량무명현변화.양성대조중,대S-Ag유반응환자화대S-Ag무반응환자IFN-γ분비량상동,단교정상인균증다(P=0.013,P=0.036).결론 대부분포도막염환자체내존재S-Ag특이성T세포,저군세포개도적Th1형면역반응재포도막염발생、복발과정중발휘중요작용.
