中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
2期
201-207
,共7页
高蒙蒙%孙桂波%斯建勇%秦蒙%罗云%孟祥宝%王敏%孙晓波
高矇矇%孫桂波%斯建勇%秦矇%囉雲%孟祥寶%王敏%孫曉波
고몽몽%손계파%사건용%진몽%라운%맹상보%왕민%손효파
红车轴草总黄酮%H2O2%内皮细胞%抗氧化%线粒体膜电位%Caspase-3
紅車軸草總黃酮%H2O2%內皮細胞%抗氧化%線粒體膜電位%Caspase-3
홍차축초총황동%H2O2%내피세포%항양화%선립체막전위%Caspase-3
目的 观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,采用H2O2诱导细胞损伤模型,观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用.MTT法检测细胞存活率、试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量、乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量;荧光法检测Caspase-3的活性;Hoechst33342及PI荧光染色法观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响;JC-1染色法检测红车轴草总黄酮对H2O2损伤血管内皮细胞线粒体膜电位的影响,检测各组细胞内ROS的表达水平.结果 与空白对照组相比,H2O2损伤组细胞存活率降低、细胞内LDH,漏出量增加(P<0.001);抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性降低、MDA含量升高(P<0.01);Caspase-3活性升高(P<0.001)、ROS含量升高、线粒体膜电位降低;与模型组相比,红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50mg·L-1)及槲皮素组(30 mg·L-1)细胞存活率明显增加(P<0.01,P<0.05),红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50 mg·L-1)及槲皮素组(30 mg·L-1)均能明显降低LDH漏出量(P<0.01,P<0.05)、明显增强SOD、CAT及GSH-Px活力(P<0.01,P<0.05)、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)、升高线粒体膜电位(P<0.01).结论红车轴草总黄酮对H2O2诱导的内皮细胞损伤有明显的保护作用,其初步作用机制可能与抗自由基,减轻脂质过氧化、降低Caspase-3活性及稳定线粒体膜电位有关.
目的 觀察紅車軸草總黃酮對H2O2誘導的血管內皮細胞損傷的保護作用,併探討其可能的作用機製.方法 利用體外培養的人臍靜脈血管內皮細胞ECV-304,採用H2O2誘導細胞損傷模型,觀察紅車軸草總黃酮對H2O2所緻的血管內皮細胞損傷的保護作用.MTT法檢測細胞存活率、試劑盒測定細胞中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及細胞中丙二醛(MDA)的含量、乳痠脫氫酶(LDH)的漏齣量;熒光法檢測Caspase-3的活性;Hoechst33342及PI熒光染色法觀察紅車軸草總黃酮對H2O2誘導血管內皮細胞凋亡的影響;JC-1染色法檢測紅車軸草總黃酮對H2O2損傷血管內皮細胞線粒體膜電位的影響,檢測各組細胞內ROS的錶達水平.結果 與空白對照組相比,H2O2損傷組細胞存活率降低、細胞內LDH,漏齣量增加(P<0.001);抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性降低、MDA含量升高(P<0.01);Caspase-3活性升高(P<0.001)、ROS含量升高、線粒體膜電位降低;與模型組相比,紅車軸草總黃酮各劑量組(12.5、25、50mg·L-1)及槲皮素組(30 mg·L-1)細胞存活率明顯增加(P<0.01,P<0.05),紅車軸草總黃酮各劑量組(12.5、25、50 mg·L-1)及槲皮素組(30 mg·L-1)均能明顯降低LDH漏齣量(P<0.01,P<0.05)、明顯增彊SOD、CAT及GSH-Px活力(P<0.01,P<0.05)、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)、升高線粒體膜電位(P<0.01).結論紅車軸草總黃酮對H2O2誘導的內皮細胞損傷有明顯的保護作用,其初步作用機製可能與抗自由基,減輕脂質過氧化、降低Caspase-3活性及穩定線粒體膜電位有關.
목적 관찰홍차축초총황동대H2O2유도적혈관내피세포손상적보호작용,병탐토기가능적작용궤제.방법 이용체외배양적인제정맥혈관내피세포ECV-304,채용H2O2유도세포손상모형,관찰홍차축초총황동대H2O2소치적혈관내피세포손상적보호작용.MTT법검측세포존활솔、시제합측정세포중초양화물기화매(SOD)、과양화경매(CAT)、곡광감태과양화물매(GSH-Px)활성급세포중병이철(MDA)적함량、유산탈경매(LDH)적루출량;형광법검측Caspase-3적활성;Hoechst33342급PI형광염색법관찰홍차축초총황동대H2O2유도혈관내피세포조망적영향;JC-1염색법검측홍차축초총황동대H2O2손상혈관내피세포선립체막전위적영향,검측각조세포내ROS적표체수평.결과 여공백대조조상비,H2O2손상조세포존활솔강저、세포내LDH,루출량증가(P<0.001);항양화매SOD、CAT、GSH-Px활성강저、MDA함량승고(P<0.01);Caspase-3활성승고(P<0.001)、ROS함량승고、선립체막전위강저;여모형조상비,홍차축초총황동각제량조(12.5、25、50mg·L-1)급곡피소조(30 mg·L-1)세포존활솔명현증가(P<0.01,P<0.05),홍차축초총황동각제량조(12.5、25、50 mg·L-1)급곡피소조(30 mg·L-1)균능명현강저LDH루출량(P<0.01,P<0.05)、명현증강SOD、CAT급GSH-Px활력(P<0.01,P<0.05)、강저MDA、ROS함량급Caspase-3활성(P<0.05,P<0.01)、승고선립체막전위(P<0.01).결론홍차축초총황동대H2O2유도적내피세포손상유명현적보호작용,기초보작용궤제가능여항자유기,감경지질과양화、강저Caspase-3활성급은정선립체막전위유관.
