扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2012年
4期
1-5
,共5页
王娟%李艳莉%厚华艳%王建业%陶洁%朱国强
王娟%李豔莉%厚華豔%王建業%陶潔%硃國彊
왕연%리염리%후화염%왕건업%도길%주국강
鹅细小病毒%VP3蛋白%单克隆抗体%抗原表位区
鵝細小病毒%VP3蛋白%單剋隆抗體%抗原錶位區
아세소병독%VP3단백%단극륭항체%항원표위구
采用杂交瘤细胞融合技术,获得3株能稳定分泌抗GPV特异性抗体的杂交瘤细胞株,免疫印迹结果表明:这3株单抗均能与纯化的GPV病毒子及重组VP3蛋白发生特异性反应,而与鸭肝炎病毒、鸭细小病毒、鹅源新城疫病毒无交叉反应.采用真核表达载体pCAGGS对VP3基因进行分段克隆并转染COS-1细胞表达,用单抗介导的间接免疫荧光(IFA)进行检测,结果表明:3E8株单抗与VP3蛋白135～332氨基酸(aa)和322～535 aa肽段均能发生特异反应,因此可以推定3E8株单抗识别的抗原表位在VP3的322～332 aa上.
採用雜交瘤細胞融閤技術,穫得3株能穩定分泌抗GPV特異性抗體的雜交瘤細胞株,免疫印跡結果錶明:這3株單抗均能與純化的GPV病毒子及重組VP3蛋白髮生特異性反應,而與鴨肝炎病毒、鴨細小病毒、鵝源新城疫病毒無交扠反應.採用真覈錶達載體pCAGGS對VP3基因進行分段剋隆併轉染COS-1細胞錶達,用單抗介導的間接免疫熒光(IFA)進行檢測,結果錶明:3E8株單抗與VP3蛋白135～332氨基痠(aa)和322～535 aa肽段均能髮生特異反應,因此可以推定3E8株單抗識彆的抗原錶位在VP3的322～332 aa上.
채용잡교류세포융합기술,획득3주능은정분비항GPV특이성항체적잡교류세포주,면역인적결과표명:저3주단항균능여순화적GPV병독자급중조VP3단백발생특이성반응,이여압간염병독、압세소병독、아원신성역병독무교차반응.채용진핵표체재체pCAGGS대VP3기인진행분단극륭병전염COS-1세포표체,용단항개도적간접면역형광(IFA)진행검측,결과표명:3E8주단항여VP3단백135～332안기산(aa)화322～535 aa태단균능발생특이반응,인차가이추정3E8주단항식별적항원표위재VP3적322～332 aa상.
