福建农业学报
福建農業學報
복건농업학보
FUJIAN JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
12期
1275-1279
,共5页
方勤美%朱继昌%池洪树%林天龙
方勤美%硃繼昌%池洪樹%林天龍
방근미%주계창%지홍수%림천룡
猪链球菌2型、PCR-ELISA%cps2j基因
豬鏈毬菌2型、PCR-ELISA%cps2j基因
저련구균2형、PCR-ELISA%cps2j기인
根据已发表的猪链球菌2型的cps2j基因序列,设计合成上游标记生物素的1对引物和1条标记地高辛的特异性探针,建立了该菌的PCR-ELISA检测方法.方法利用PCR仪作为杂交场所,并对几个主要条件参数进行优化,结果显示在鲑鱼精DNA浓度1.6mg· mL-1、变性温度为94℃、变性时间为1 min、探针浓度为0.5umol·mL-1、杂交温度55℃、杂交时间1 min、一抗作用时间45 min、二抗作用时间40 min时检测方法敏感性最好,特异性最强.通过对17个阴性样本检测,测得平均值为0.057,方差为0.047,计算得临界值为0.198.
根據已髮錶的豬鏈毬菌2型的cps2j基因序列,設計閤成上遊標記生物素的1對引物和1條標記地高辛的特異性探針,建立瞭該菌的PCR-ELISA檢測方法.方法利用PCR儀作為雜交場所,併對幾箇主要條件參數進行優化,結果顯示在鮭魚精DNA濃度1.6mg· mL-1、變性溫度為94℃、變性時間為1 min、探針濃度為0.5umol·mL-1、雜交溫度55℃、雜交時間1 min、一抗作用時間45 min、二抗作用時間40 min時檢測方法敏感性最好,特異性最彊.通過對17箇陰性樣本檢測,測得平均值為0.057,方差為0.047,計算得臨界值為0.198.
근거이발표적저련구균2형적cps2j기인서렬,설계합성상유표기생물소적1대인물화1조표기지고신적특이성탐침,건립료해균적PCR-ELISA검측방법.방법이용PCR의작위잡교장소,병대궤개주요조건삼수진행우화,결과현시재해어정DNA농도1.6mg· mL-1、변성온도위94℃、변성시간위1 min、탐침농도위0.5umol·mL-1、잡교온도55℃、잡교시간1 min、일항작용시간45 min、이항작용시간40 min시검측방법민감성최호,특이성최강.통과대17개음성양본검측,측득평균치위0.057,방차위0.047,계산득림계치위0.198.
