中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
1期
128-132
,共5页
徐嘉%徐雪%王中华%胡旭初%詹蔚%叶子%詹红%熊艳
徐嘉%徐雪%王中華%鬍旭初%詹蔚%葉子%詹紅%熊豔
서가%서설%왕중화%호욱초%첨위%협자%첨홍%웅염
慢性华支睾吸虫感染%脂多糖类%细胞因子类%M1型巨噬细胞%M2型巨噬细胞
慢性華支睪吸蟲感染%脂多糖類%細胞因子類%M1型巨噬細胞%M2型巨噬細胞
만성화지고흡충감염%지다당류%세포인자류%M1형거서세포%M2형거서세포
目的:了解慢性华支睾吸虫(Cs)感染的免疫状态及其对巨噬细胞表型和炎症反应的影响.方法:选择Sprague-Dawley雄性大鼠,按随机数字表法分组进行2部分实验.(1)经口华支睾吸虫虫卵灌胃感染70 d建立慢性Cs感染模型,分为正常对照组和慢性Cs感染组,每组10只,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素4(IL-4)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)水平,腹腔灌洗获取巨噬细胞,流式细胞术检测腹腔巨噬细胞亚型；(2)腹腔灌洗获取巨噬细胞,按照腹腔巨噬细胞的来源,分为空白对照组、正常组和慢性Cs感染组,以脂多糖(LPS,10 μg/L)刺激孵育,用ELISA法动态监测LPS刺激后0、2、12和24 h细胞培养上清液的TNF-α和IL-10的变化.结果:(1)慢性Cs感染组大鼠血清促炎因子TNF-α[(77.64±3.25) ng/L]和IFN-γ[(212.69±12.60) ng/L]水平较正常组TNF-α[(55.13±3.25) ng/L]和IFN-γ[(108.15±10.49) ng/L]升高(均P＜0.05),而抗炎因子IL-4[(248.24±8.99) ng/L]和IL-10[(223.56±5.60) ng/L]水平较正常组血清IL-4[(52.40±3.97) ng/L]和IL-10[(60.18 ±5.36) ng/L]也显著升高(均P＜0.01),并可使腹腔巨噬细胞向替代活化型(M2型)巨噬细胞分化；(2)2组腹腔巨噬细胞培养上清液TNF-α水平在LPS刺激后2h即开始上升,至24h达到高峰,慢性Cs感染组巨噬细胞在LPS刺激后2、12和24h上清液的TNF-α水平均显著低于正常大鼠组[2 h:(88.20±1.91) ng/L vs(123.45±2.98) ng/L;12 h:(123.66±4.31) ng/L vs(161.11±7.38) ng/L;24h:(154.52±4.83) ng/L vs(227.85±10.67) ng/L,均P＜0.05],而IL-10的水平较正常组升高[2 h:(105.46±12.28) ng/L vs(80.86±2.28) ng/L;12 h:(194.19±8.62) ng/L vs(117.56±8.02) ng/L;24 h:(280.02±11.31) ng/L vs(168.14±8.97) ng/L,均P＜0.05].结论:慢性Cs感染时宿主血清的促炎因子升高,而抗炎因子升高得更明显,使巨噬细胞向M2型极化；体外实验表明慢性Cs感染宿主的巨噬细胞对LPS刺激产生耐受.
目的:瞭解慢性華支睪吸蟲(Cs)感染的免疫狀態及其對巨噬細胞錶型和炎癥反應的影響.方法:選擇Sprague-Dawley雄性大鼠,按隨機數字錶法分組進行2部分實驗.(1)經口華支睪吸蟲蟲卵灌胃感染70 d建立慢性Cs感染模型,分為正常對照組和慢性Cs感染組,每組10隻,用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測大鼠血清白細胞介素4(IL-4)、IL-10、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和榦擾素γ(IFN-γ)水平,腹腔灌洗穫取巨噬細胞,流式細胞術檢測腹腔巨噬細胞亞型；(2)腹腔灌洗穫取巨噬細胞,按照腹腔巨噬細胞的來源,分為空白對照組、正常組和慢性Cs感染組,以脂多糖(LPS,10 μg/L)刺激孵育,用ELISA法動態鑑測LPS刺激後0、2、12和24 h細胞培養上清液的TNF-α和IL-10的變化.結果:(1)慢性Cs感染組大鼠血清促炎因子TNF-α[(77.64±3.25) ng/L]和IFN-γ[(212.69±12.60) ng/L]水平較正常組TNF-α[(55.13±3.25) ng/L]和IFN-γ[(108.15±10.49) ng/L]升高(均P＜0.05),而抗炎因子IL-4[(248.24±8.99) ng/L]和IL-10[(223.56±5.60) ng/L]水平較正常組血清IL-4[(52.40±3.97) ng/L]和IL-10[(60.18 ±5.36) ng/L]也顯著升高(均P＜0.01),併可使腹腔巨噬細胞嚮替代活化型(M2型)巨噬細胞分化；(2)2組腹腔巨噬細胞培養上清液TNF-α水平在LPS刺激後2h即開始上升,至24h達到高峰,慢性Cs感染組巨噬細胞在LPS刺激後2、12和24h上清液的TNF-α水平均顯著低于正常大鼠組[2 h:(88.20±1.91) ng/L vs(123.45±2.98) ng/L;12 h:(123.66±4.31) ng/L vs(161.11±7.38) ng/L;24h:(154.52±4.83) ng/L vs(227.85±10.67) ng/L,均P＜0.05],而IL-10的水平較正常組升高[2 h:(105.46±12.28) ng/L vs(80.86±2.28) ng/L;12 h:(194.19±8.62) ng/L vs(117.56±8.02) ng/L;24 h:(280.02±11.31) ng/L vs(168.14±8.97) ng/L,均P＜0.05].結論:慢性Cs感染時宿主血清的促炎因子升高,而抗炎因子升高得更明顯,使巨噬細胞嚮M2型極化；體外實驗錶明慢性Cs感染宿主的巨噬細胞對LPS刺激產生耐受.
목적:료해만성화지고흡충(Cs)감염적면역상태급기대거서세포표형화염증반응적영향.방법:선택Sprague-Dawley웅성대서,안수궤수자표법분조진행2부분실험.(1)경구화지고흡충충란관위감염70 d건립만성Cs감염모형,분위정상대조조화만성Cs감염조,매조10지,용매련면역흡부법(ELISA)검측대서혈청백세포개소4(IL-4)、IL-10、종류배사인자α(TNF-α)화간우소γ(IFN-γ)수평,복강관세획취거서세포,류식세포술검측복강거서세포아형；(2)복강관세획취거서세포,안조복강거서세포적래원,분위공백대조조、정상조화만성Cs감염조,이지다당(LPS,10 μg/L)자격부육,용ELISA법동태감측LPS자격후0、2、12화24 h세포배양상청액적TNF-α화IL-10적변화.결과:(1)만성Cs감염조대서혈청촉염인자TNF-α[(77.64±3.25) ng/L]화IFN-γ[(212.69±12.60) ng/L]수평교정상조TNF-α[(55.13±3.25) ng/L]화IFN-γ[(108.15±10.49) ng/L]승고(균P＜0.05),이항염인자IL-4[(248.24±8.99) ng/L]화IL-10[(223.56±5.60) ng/L]수평교정상조혈청IL-4[(52.40±3.97) ng/L]화IL-10[(60.18 ±5.36) ng/L]야현저승고(균P＜0.01),병가사복강거서세포향체대활화형(M2형)거서세포분화；(2)2조복강거서세포배양상청액TNF-α수평재LPS자격후2h즉개시상승,지24h체도고봉,만성Cs감염조거서세포재LPS자격후2、12화24h상청액적TNF-α수평균현저저우정상대서조[2 h:(88.20±1.91) ng/L vs(123.45±2.98) ng/L;12 h:(123.66±4.31) ng/L vs(161.11±7.38) ng/L;24h:(154.52±4.83) ng/L vs(227.85±10.67) ng/L,균P＜0.05],이IL-10적수평교정상조승고[2 h:(105.46±12.28) ng/L vs(80.86±2.28) ng/L;12 h:(194.19±8.62) ng/L vs(117.56±8.02) ng/L;24 h:(280.02±11.31) ng/L vs(168.14±8.97) ng/L,균P＜0.05].결론:만성Cs감염시숙주혈청적촉염인자승고,이항염인자승고득경명현,사거서세포향M2형겁화；체외실험표명만성Cs감염숙주적거서세포대LPS자격산생내수.
