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CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2013年
1期
59-63
,共5页
毛细管区带电泳%蛋白C激活剂%蛋白C%相互作用%五步蛇毒
毛細管區帶電泳%蛋白C激活劑%蛋白C%相互作用%五步蛇毒
모세관구대전영%단백C격활제%단백C%상호작용%오보사독
建立了毛细管区带电泳分析五步蛇毒蛋白C激活剂(protein C activator,PCA)与血浆蛋白C(protein C,PC)的相互作用.以未涂层毛细管(60.2 cm(有效长度50 cm)×75 μm)为分离柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)为运行缓冲液,于198 nm波长下检测.对影响五步蛇毒PCA分离的因素(如缓冲液、离子浓度)及在37.5℃下孵育不同时间的五步蛇毒PCA与PC的相互作用进行考察.方法的检出限(以信噪比为3计)为3 mg/L,线性范围为10 ～ 300 mg/L.五步蛇毒PCA迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.56％和3.8％(n=6).等体积的五步蛇毒PCA(200 mg/L)与PC(60 mg/L)孵育5 min,其结合率达到最大,且谱图中未见有PC水解的肽链.该五步蛇毒PCA可改变PC空间构象直接激活PC.该方法简单,灵敏度和分辨率高,分析结果为今后快速检测五步蛇毒PCA及其活性提供了重要的理论依据.
建立瞭毛細管區帶電泳分析五步蛇毒蛋白C激活劑(protein C activator,PCA)與血漿蛋白C(protein C,PC)的相互作用.以未塗層毛細管(60.2 cm(有效長度50 cm)×75 μm)為分離柱,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)為運行緩遲液,于198 nm波長下檢測.對影響五步蛇毒PCA分離的因素(如緩遲液、離子濃度)及在37.5℃下孵育不同時間的五步蛇毒PCA與PC的相互作用進行攷察.方法的檢齣限(以信譟比為3計)為3 mg/L,線性範圍為10 ～ 300 mg/L.五步蛇毒PCA遷移時間和峰麵積的相對標準偏差分彆為0.56％和3.8％(n=6).等體積的五步蛇毒PCA(200 mg/L)與PC(60 mg/L)孵育5 min,其結閤率達到最大,且譜圖中未見有PC水解的肽鏈.該五步蛇毒PCA可改變PC空間構象直接激活PC.該方法簡單,靈敏度和分辨率高,分析結果為今後快速檢測五步蛇毒PCA及其活性提供瞭重要的理論依據.
건립료모세관구대전영분석오보사독단백C격활제(protein C activator,PCA)여혈장단백C(protein C,PC)적상호작용.이미도층모세관(60.2 cm(유효장도50 cm)×75 μm)위분리주,50 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)위운행완충액,우198 nm파장하검측.대영향오보사독PCA분리적인소(여완충액、리자농도)급재37.5℃하부육불동시간적오보사독PCA여PC적상호작용진행고찰.방법적검출한(이신조비위3계)위3 mg/L,선성범위위10 ～ 300 mg/L.오보사독PCA천이시간화봉면적적상대표준편차분별위0.56％화3.8％(n=6).등체적적오보사독PCA(200 mg/L)여PC(60 mg/L)부육5 min,기결합솔체도최대,차보도중미견유PC수해적태련.해오보사독PCA가개변PC공간구상직접격활PC.해방법간단,령민도화분변솔고,분석결과위금후쾌속검측오보사독PCA급기활성제공료중요적이론의거.
