上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2013年
1期
12-18,24
,共8页
亢渝俊%王川%姜政%王丕龙
亢渝俊%王川%薑政%王丕龍
항투준%왕천%강정%왕비룡
细胞外金属蛋白酶诱导因子%短发夹RNA%SGC-7901%侵袭%迁移
細胞外金屬蛋白酶誘導因子%短髮夾RNA%SGC-7901%侵襲%遷移
세포외금속단백매유도인자%단발협RNA%SGC-7901%침습%천이
目的 构建人细胞外金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)短发夹RNA(shRNA),研究其对人胃癌细胞SGC-7901侵袭与迁移的影响.方法 体外设计合成针对人EMMPRIN的4组小干扰RNA (siRNA),退火形成双链shRNA,并插入pGenesil-1质粒中.经测序鉴定及RT-PCR和Western blotting筛选出沉默效果明显的干扰质粒,通过脂质体Lipofectamine 2000转染SGC-7901细胞,Transewell法检测重组干扰质粒对SGC-7901细胞侵袭及迁移能力的影响.结果 成功构建并筛选出pshRNA-EMMPRIN干扰质粒.重组干扰质粒转染SGC-7901细胞后,细胞EMMPRIN mRNA和蛋白表达显著降低.Transewell法检测发现,在转染重组干扰质粒的SGC-7901细胞中,侵袭细胞和迁移细胞的个数明显减少.结论 下调EMMPRIN表达能够显著减弱肿瘤的侵袭和迁移能力,为进一步研究EMMPRIN对消化道肿瘤的基因治疗奠定了基础.
目的 構建人細胞外金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN)短髮夾RNA(shRNA),研究其對人胃癌細胞SGC-7901侵襲與遷移的影響.方法 體外設計閤成針對人EMMPRIN的4組小榦擾RNA (siRNA),退火形成雙鏈shRNA,併插入pGenesil-1質粒中.經測序鑒定及RT-PCR和Western blotting篩選齣沉默效果明顯的榦擾質粒,通過脂質體Lipofectamine 2000轉染SGC-7901細胞,Transewell法檢測重組榦擾質粒對SGC-7901細胞侵襲及遷移能力的影響.結果 成功構建併篩選齣pshRNA-EMMPRIN榦擾質粒.重組榦擾質粒轉染SGC-7901細胞後,細胞EMMPRIN mRNA和蛋白錶達顯著降低.Transewell法檢測髮現,在轉染重組榦擾質粒的SGC-7901細胞中,侵襲細胞和遷移細胞的箇數明顯減少.結論 下調EMMPRIN錶達能夠顯著減弱腫瘤的侵襲和遷移能力,為進一步研究EMMPRIN對消化道腫瘤的基因治療奠定瞭基礎.
목적 구건인세포외금속단백매유도인자(EMMPRIN)단발협RNA(shRNA),연구기대인위암세포SGC-7901침습여천이적영향.방법 체외설계합성침대인EMMPRIN적4조소간우RNA (siRNA),퇴화형성쌍련shRNA,병삽입pGenesil-1질립중.경측서감정급RT-PCR화Western blotting사선출침묵효과명현적간우질립,통과지질체Lipofectamine 2000전염SGC-7901세포,Transewell법검측중조간우질립대SGC-7901세포침습급천이능력적영향.결과 성공구건병사선출pshRNA-EMMPRIN간우질립.중조간우질립전염SGC-7901세포후,세포EMMPRIN mRNA화단백표체현저강저.Transewell법검측발현,재전염중조간우질립적SGC-7901세포중,침습세포화천이세포적개수명현감소.결론 하조EMMPRIN표체능구현저감약종류적침습화천이능력,위진일보연구EMMPRIN대소화도종류적기인치료전정료기출.
