上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2013年
1期
1-5
,共5页
王斌%金才益%童海骏%戴尅戎%张晓玲
王斌%金纔益%童海駿%戴尅戎%張曉玲
왕빈%금재익%동해준%대극융%장효령
PCL-PEG-chitosan%修饰%DNA%转染%氮磷比
PCL-PEG-chitosan%脩飾%DNA%轉染%氮燐比
PCL-PEG-chitosan%수식%DNA%전염%담린비
目的 优化新型纳米非病毒载体聚己内酯(PCL)-聚乙二醇(PEG)-壳聚糖(chitosan)(PCL-PEG-chitosan)在体外与质粒的复合条件,并进行转染活性测定.方法 在体外利用凝胶电泳方法确定非病毒载体与携带绿色荧光蛋白基因的质粒(pEGFP)复合的最小氮磷比.利用动态光散射粒径测量仪确定复合物在不同氮磷比、不同缓冲溶液体系下粒径的变化情况.将pEGFP与PCL-PEG-chitosan进行复合后转染293T细胞,荧光显微镜观察转染效率.结果 凝胶电泳结果显示,非病毒载体PCL-PEG-chitosan与pEGFP复合的最小氮磷比为4∶1,PC L-chitosan与pEGFP复合的最小氮磷比也为4∶1,chitosan与pEGFP复合的最小氮磷比为1∶1.动态光散射实验结果显示:非病毒载体PCL-PEG-chitosan与pEGFP复合而成的复合物的粒径随着氮磷比的增大而减小；在醋酸盐缓冲体系与DMEM缓冲体系中,复合物的粒径基本一致,相对稳定.荧光显微镜观察发现,经过接枝改性的纳米载体PCL-PEG-chitosan的转染效率有所提高.结论 PCL修饰可减弱chitosan对pEGFP的复合能力,提高最低复合氮磷比.经PCL和PEG修饰的纳米载体PCL-PEG-chitosan的细胞转染活性有所提高,但尚需进一步改进.
目的 優化新型納米非病毒載體聚己內酯(PCL)-聚乙二醇(PEG)-殼聚糖(chitosan)(PCL-PEG-chitosan)在體外與質粒的複閤條件,併進行轉染活性測定.方法 在體外利用凝膠電泳方法確定非病毒載體與攜帶綠色熒光蛋白基因的質粒(pEGFP)複閤的最小氮燐比.利用動態光散射粒徑測量儀確定複閤物在不同氮燐比、不同緩遲溶液體繫下粒徑的變化情況.將pEGFP與PCL-PEG-chitosan進行複閤後轉染293T細胞,熒光顯微鏡觀察轉染效率.結果 凝膠電泳結果顯示,非病毒載體PCL-PEG-chitosan與pEGFP複閤的最小氮燐比為4∶1,PC L-chitosan與pEGFP複閤的最小氮燐比也為4∶1,chitosan與pEGFP複閤的最小氮燐比為1∶1.動態光散射實驗結果顯示:非病毒載體PCL-PEG-chitosan與pEGFP複閤而成的複閤物的粒徑隨著氮燐比的增大而減小；在醋痠鹽緩遲體繫與DMEM緩遲體繫中,複閤物的粒徑基本一緻,相對穩定.熒光顯微鏡觀察髮現,經過接枝改性的納米載體PCL-PEG-chitosan的轉染效率有所提高.結論 PCL脩飾可減弱chitosan對pEGFP的複閤能力,提高最低複閤氮燐比.經PCL和PEG脩飾的納米載體PCL-PEG-chitosan的細胞轉染活性有所提高,但尚需進一步改進.
목적 우화신형납미비병독재체취기내지(PCL)-취을이순(PEG)-각취당(chitosan)(PCL-PEG-chitosan)재체외여질립적복합조건,병진행전염활성측정.방법 재체외이용응효전영방법학정비병독재체여휴대록색형광단백기인적질립(pEGFP)복합적최소담린비.이용동태광산사립경측량의학정복합물재불동담린비、불동완충용액체계하립경적변화정황.장pEGFP여PCL-PEG-chitosan진행복합후전염293T세포,형광현미경관찰전염효솔.결과 응효전영결과현시,비병독재체PCL-PEG-chitosan여pEGFP복합적최소담린비위4∶1,PC L-chitosan여pEGFP복합적최소담린비야위4∶1,chitosan여pEGFP복합적최소담린비위1∶1.동태광산사실험결과현시:비병독재체PCL-PEG-chitosan여pEGFP복합이성적복합물적립경수착담린비적증대이감소；재작산염완충체계여DMEM완충체계중,복합물적립경기본일치,상대은정.형광현미경관찰발현,경과접지개성적납미재체PCL-PEG-chitosan적전염효솔유소제고.결론 PCL수식가감약chitosan대pEGFP적복합능력,제고최저복합담린비.경PCL화PEG수식적납미재체PCL-PEG-chitosan적세포전염활성유소제고,단상수진일보개진.
