解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2013年
1期
53-56,60
,共5页
董雪松%孙裕强%刘伟%刘志
董雪鬆%孫裕彊%劉偉%劉誌
동설송%손유강%류위%류지
RNA干扰%基因沉默%短发夹RNA%Smad3%小鼠
RNA榦擾%基因沉默%短髮夾RNA%Smad3%小鼠
RNA간우%기인침묵%단발협RNA%Smad3%소서
目的 设计特异性shRNA并检测其对小鼠L929成纤维细胞Smad3基因的抑制作用.方法 根据小鼠Smad3 mRNA,编码3种不同序列shRNA.shRNA1起始位置为第495位核苷酸,GC含量为42.1％；shRNA2起始位置第562位核苷酸,GC含量为52.6％; shRNA3起始位置第1473位核苷酸,GC含量为52.6％.3种shRNA被合成进质粒pGenesil1.1.合成后的质粒pGenesil 1.1 Smad3-1,pGenesil1.1 Smad3-2和pGenesil1.1 Smad3-3分别转染体外培养的小鼠L929成纤维细胞,同时设立空白对照组和负对照组.48和72h后通过Real time PCR和Western blot检测其对Smad3基因表达的影响.结果 3种shRNA对Smad3基因在小鼠L929成纤维细胞表达在48和72h均有不同程度的抑制作用.其中,以shRNA2和shRNA3抑制效果最为明显.结论 合成特异性的shRNA可以有效抑制Smad3基因在小鼠L929成纤维细胞的表达.
目的 設計特異性shRNA併檢測其對小鼠L929成纖維細胞Smad3基因的抑製作用.方法 根據小鼠Smad3 mRNA,編碼3種不同序列shRNA.shRNA1起始位置為第495位覈苷痠,GC含量為42.1％；shRNA2起始位置第562位覈苷痠,GC含量為52.6％; shRNA3起始位置第1473位覈苷痠,GC含量為52.6％.3種shRNA被閤成進質粒pGenesil1.1.閤成後的質粒pGenesil 1.1 Smad3-1,pGenesil1.1 Smad3-2和pGenesil1.1 Smad3-3分彆轉染體外培養的小鼠L929成纖維細胞,同時設立空白對照組和負對照組.48和72h後通過Real time PCR和Western blot檢測其對Smad3基因錶達的影響.結果 3種shRNA對Smad3基因在小鼠L929成纖維細胞錶達在48和72h均有不同程度的抑製作用.其中,以shRNA2和shRNA3抑製效果最為明顯.結論 閤成特異性的shRNA可以有效抑製Smad3基因在小鼠L929成纖維細胞的錶達.
목적 설계특이성shRNA병검측기대소서L929성섬유세포Smad3기인적억제작용.방법 근거소서Smad3 mRNA,편마3충불동서렬shRNA.shRNA1기시위치위제495위핵감산,GC함량위42.1％；shRNA2기시위치제562위핵감산,GC함량위52.6％; shRNA3기시위치제1473위핵감산,GC함량위52.6％.3충shRNA피합성진질립pGenesil1.1.합성후적질립pGenesil 1.1 Smad3-1,pGenesil1.1 Smad3-2화pGenesil1.1 Smad3-3분별전염체외배양적소서L929성섬유세포,동시설립공백대조조화부대조조.48화72h후통과Real time PCR화Western blot검측기대Smad3기인표체적영향.결과 3충shRNA대Smad3기인재소서L929성섬유세포표체재48화72h균유불동정도적억제작용.기중,이shRNA2화shRNA3억제효과최위명현.결론 합성특이성적shRNA가이유효억제Smad3기인재소서L929성섬유세포적표체.
