动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
19-23
,共5页
刘腾飞%冯磊%田永发%刘畅%姜巍%严婷婷%高凤山
劉騰飛%馮磊%田永髮%劉暢%薑巍%嚴婷婷%高鳳山
류등비%풍뢰%전영발%류창%강외%엄정정%고봉산
托佩克猪%SLA-2基因%密码子优化%表达
託珮剋豬%SLA-2基因%密碼子優化%錶達
탁패극저%SLA-2기인%밀마자우화%표체
为提高托佩克猪SLA-2-TPK基因胞外区在pET-21a的表达量,对其5’端进行密码子优化,并设计表达引物,PCR扩增SLA-2-TPK胞外区,然后克隆入pMD(R)19-T Simple Vector,经酶切鉴定后连接至pET-21a载体,转化BL21 (Rosseta)进行诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白.PCR结果显示,SLA-2-TPKe大小约为850 bp,并成功克隆入pMD(R)19-T Simple Vector,双酶切后大小为834 bp.酶切后的SLA-2-TPKe成功与pET-21a链接,重组菌经诱导后目的蛋白大小为30.9 ku,与密码子优化前重组菌相比,目的蛋白相对表达含量提高约40％.研究证明,密码子优化可明显提高蛋白的袁达量,为进行其他蛋白表达研究提供了参考.
為提高託珮剋豬SLA-2-TPK基因胞外區在pET-21a的錶達量,對其5’耑進行密碼子優化,併設計錶達引物,PCR擴增SLA-2-TPK胞外區,然後剋隆入pMD(R)19-T Simple Vector,經酶切鑒定後連接至pET-21a載體,轉化BL21 (Rosseta)進行誘導錶達,SDS-PAGE檢測目的蛋白.PCR結果顯示,SLA-2-TPKe大小約為850 bp,併成功剋隆入pMD(R)19-T Simple Vector,雙酶切後大小為834 bp.酶切後的SLA-2-TPKe成功與pET-21a鏈接,重組菌經誘導後目的蛋白大小為30.9 ku,與密碼子優化前重組菌相比,目的蛋白相對錶達含量提高約40％.研究證明,密碼子優化可明顯提高蛋白的袁達量,為進行其他蛋白錶達研究提供瞭參攷.
위제고탁패극저SLA-2-TPK기인포외구재pET-21a적표체량,대기5’단진행밀마자우화,병설계표체인물,PCR확증SLA-2-TPK포외구,연후극륭입pMD(R)19-T Simple Vector,경매절감정후련접지pET-21a재체,전화BL21 (Rosseta)진행유도표체,SDS-PAGE검측목적단백.PCR결과현시,SLA-2-TPKe대소약위850 bp,병성공극륭입pMD(R)19-T Simple Vector,쌍매절후대소위834 bp.매절후적SLA-2-TPKe성공여pET-21a련접,중조균경유도후목적단백대소위30.9 ku,여밀마자우화전중조균상비,목적단백상대표체함량제고약40％.연구증명,밀마자우화가명현제고단백적원체량,위진행기타단백표체연구제공료삼고.
