CAJ | 학술논문

采用变性和非变性电泳、高效凝胶排阻色谱、内源荧光发射光谱和荧光相图以及生物活性测定等方法,研究了盐酸胍诱导的变性卵清溶菌酶分子的重折叠过程及此过程中卵清溶菌酶分子各稳定构象态的分布和过渡.结果表明,当复性液中盐酸胍浓度分别约为5.0和2.4 mol/L时,变性卵清溶菌酶分子的重折叠过程各存在1个稳定折叠中间态,重折叠过程符合“四态模型”.在卵清溶菌酶分子四态重折叠过程基础上,结合盐酸胍与卵清溶菌酶分子之间的缔合-解离平衡,给出了一个定量描述变性剂诱导的蛋白质分子复性过程中蛋白质分子复性率随溶液中变性剂浓度变化的方程.该方程包含2个特征折叠参数,一个是蛋白质分子从一个稳定构象态过渡到另一个稳定构象态的热力学过渡平衡常数k；另一个是在此过程中平均每个蛋白质分子所结合的变性剂分子数目m.通过这2个特征折叠参数能够定量描述盐酸胍诱导的变性卵清溶菌酶完全去折叠态、折叠中间态和天然态分子随复性液中盐酸胍浓度变化的分布和过渡情况.
채용변성화비변성전영、고효응효배조색보、내원형광발사광보화형광상도이급생물활성측정등방법,연구료염산고유도적변성란청용균매분자적중절첩과정급차과정중란청용균매분자각은정구상태적분포화과도.결과표명,당복성액중염산고농도분별약위5.0화2.4 mol/L시,변성란청용균매분자적중절첩과정각존재1개은정절첩중간태,중절첩과정부합“사태모형”.재란청용균매분자사태중절첩과정기출상,결합염산고여란청용균매분자지간적체합-해리평형,급출료일개정량묘술변성제유도적단백질분자복성과정중단백질분자복성솔수용액중변성제농도변화적방정.해방정포함2개특정절첩삼수,일개시단백질분자종일개은정구상태과도도령일개은정구상태적열역학과도평형상수k；령일개시재차과정중평균매개단백질분자소결합적변성제분자수목m.통과저2개특정절첩삼수능구정량묘술염산고유도적변성란청용균매완전거절첩태、절첩중간태화천연태분자수복성액중염산고농도변화적분포화과도정황.