南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
2期
243-248
,共6页
崔明星%詹新立%刘会江%贺聚良%顾容赫%黄圣升
崔明星%詹新立%劉會江%賀聚良%顧容赫%黃聖升
최명성%첨신립%류회강%하취량%고용혁%황골승
前列腺癌%PC-3细胞%慢病毒属%绿色荧光蛋白%动物模型%活体荧光成像系统
前列腺癌%PC-3細胞%慢病毒屬%綠色熒光蛋白%動物模型%活體熒光成像繫統
전렬선암%PC-3세포%만병독속%록색형광단백%동물모형%활체형광성상계통
目的 对人前列腺癌PC-3细胞进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,并建立其在动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移的前列腺癌脊柱转移模型.方法 常规肿瘤细胞培养、传代,在细胞状态最佳时以不同病毒感染复数实行GFP慢病毒对PC-3的感染,7d后在荧光显微镜下观察GFP在PC-3的表达情况.选取感染GFP阳性表达率最高的孔继续扩大培养,然后采用悬液注射于小鼠的下腔静脉,动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移,3个月后处死荷瘤鼠,常规石蜡切片苏木素-伊红(HE)染色观察.结果 经绿色荧光蛋白标记后人前列腺癌PC-3细胞在荧光显微镜下发出绿光,并可在体内、外持续稳定表达；下腔静脉注射1.5×106转染后的前列腺癌细胞后1周即可在活体荧光成像系统下观察到腰背部有绿色荧光显像,4周时可见表达绿色荧光的肿瘤增大,肿瘤骨转移率为19％(3/16)；3个月后解剖裸鼠可见有3只裸鼠腰椎有肿瘤浸润,与动物活体荧光成像系统结果一致,转移率约为19％ (3/16).结论 GFP慢病毒能够高效标记人前列腺癌PC-3细胞且不影响其生物学特性,并能够持久稳定表达；用绿色荧光蛋白标记的人前列腺癌PC-3细胞成功地建立了裸鼠脊柱骨转移模型,为进一步研究前列腺癌骨转移提供了一种简便、可行的新方法.
目的 對人前列腺癌PC-3細胞進行綠色熒光蛋白(GFP)標記,併建立其在動物活體熒光成像繫統下直接觀察腫瘤生長及轉移的前列腺癌脊柱轉移模型.方法 常規腫瘤細胞培養、傳代,在細胞狀態最佳時以不同病毒感染複數實行GFP慢病毒對PC-3的感染,7d後在熒光顯微鏡下觀察GFP在PC-3的錶達情況.選取感染GFP暘性錶達率最高的孔繼續擴大培養,然後採用懸液註射于小鼠的下腔靜脈,動物活體熒光成像繫統下直接觀察腫瘤生長及轉移,3箇月後處死荷瘤鼠,常規石蠟切片囌木素-伊紅(HE)染色觀察.結果 經綠色熒光蛋白標記後人前列腺癌PC-3細胞在熒光顯微鏡下髮齣綠光,併可在體內、外持續穩定錶達；下腔靜脈註射1.5×106轉染後的前列腺癌細胞後1週即可在活體熒光成像繫統下觀察到腰揹部有綠色熒光顯像,4週時可見錶達綠色熒光的腫瘤增大,腫瘤骨轉移率為19％(3/16)；3箇月後解剖裸鼠可見有3隻裸鼠腰椎有腫瘤浸潤,與動物活體熒光成像繫統結果一緻,轉移率約為19％ (3/16).結論 GFP慢病毒能夠高效標記人前列腺癌PC-3細胞且不影響其生物學特性,併能夠持久穩定錶達；用綠色熒光蛋白標記的人前列腺癌PC-3細胞成功地建立瞭裸鼠脊柱骨轉移模型,為進一步研究前列腺癌骨轉移提供瞭一種簡便、可行的新方法.
목적 대인전렬선암PC-3세포진행록색형광단백(GFP)표기,병건립기재동물활체형광성상계통하직접관찰종류생장급전이적전렬선암척주전이모형.방법 상규종류세포배양、전대,재세포상태최가시이불동병독감염복수실행GFP만병독대PC-3적감염,7d후재형광현미경하관찰GFP재PC-3적표체정황.선취감염GFP양성표체솔최고적공계속확대배양,연후채용현액주사우소서적하강정맥,동물활체형광성상계통하직접관찰종류생장급전이,3개월후처사하류서,상규석사절편소목소-이홍(HE)염색관찰.결과 경록색형광단백표기후인전렬선암PC-3세포재형광현미경하발출록광,병가재체내、외지속은정표체；하강정맥주사1.5×106전염후적전렬선암세포후1주즉가재활체형광성상계통하관찰도요배부유록색형광현상,4주시가견표체록색형광적종류증대,종류골전이솔위19％(3/16)；3개월후해부라서가견유3지라서요추유종류침윤,여동물활체형광성상계통결과일치,전이솔약위19％ (3/16).결론 GFP만병독능구고효표기인전렬선암PC-3세포차불영향기생물학특성,병능구지구은정표체；용록색형광단백표기적인전렬선암PC-3세포성공지건립료라서척주골전이모형,위진일보연구전렬선암골전이제공료일충간편、가행적신방법.
