南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
2期
197-201
,共5页
余晶仪%郝小燕%龙敏%王勤%屈娅荣%温扬明%张文炳%罗军%曹虹
餘晶儀%郝小燕%龍敏%王勤%屈婭榮%溫颺明%張文炳%囉軍%曹虹
여정의%학소연%룡민%왕근%굴아영%온양명%장문병%라군%조홍
MUC2%shRNA%益生菌%E.coli K1 (E44)%粘附与侵袭
MUC2%shRNA%益生菌%E.coli K1 (E44)%粘附與侵襲
MUC2%shRNA%익생균%E.coli K1 (E44)%점부여침습
目的 观察益生菌诱导的乳鼠结肠MUC2基因的表达及其对益生菌抑制E.coli K1株E44黏附侵袭肠屏障作用的影响.方法 SD乳鼠分别用益生菌、E44株和益生菌+E44株三组灌胃7d后,RT-PCR法观察益生菌和E44株诱导结肠MUC2基因的表达；靶向MUC2基因的shRNA真核质粒表达载体(shRNA MUC2)和阴性对照shRNA NC转染人结肠癌Lovo细胞,荧光定量PCR法检测其表达水平,并通过竞争性排斥方法检测MUC2基因对益生菌拮抗致病菌E44粘附侵袭的影响.结果 灌胃益生菌组SD乳鼠肠道MUC2基因明显上调,而E44组则显著降低.用shRNA MUC2转染Lovo细胞后,与阴性对照组和空白对照组相比,其表达水平明显降低,干扰率为66.7％；益生菌对E44株粘附侵袭抑制作用明显低于未处理组,与对照组相比,E44相对粘附率为56.64％,相对侵袭率为66.64％.结论 益生菌诱导的MUC2基因表达上调可能成为拮抗致病菌易位的保护机制之一；MUC2基因沉默后,益生菌对E44粘附侵袭肠上皮细胞的抑制作用明显降低.
目的 觀察益生菌誘導的乳鼠結腸MUC2基因的錶達及其對益生菌抑製E.coli K1株E44黏附侵襲腸屏障作用的影響.方法 SD乳鼠分彆用益生菌、E44株和益生菌+E44株三組灌胃7d後,RT-PCR法觀察益生菌和E44株誘導結腸MUC2基因的錶達；靶嚮MUC2基因的shRNA真覈質粒錶達載體(shRNA MUC2)和陰性對照shRNA NC轉染人結腸癌Lovo細胞,熒光定量PCR法檢測其錶達水平,併通過競爭性排斥方法檢測MUC2基因對益生菌拮抗緻病菌E44粘附侵襲的影響.結果 灌胃益生菌組SD乳鼠腸道MUC2基因明顯上調,而E44組則顯著降低.用shRNA MUC2轉染Lovo細胞後,與陰性對照組和空白對照組相比,其錶達水平明顯降低,榦擾率為66.7％；益生菌對E44株粘附侵襲抑製作用明顯低于未處理組,與對照組相比,E44相對粘附率為56.64％,相對侵襲率為66.64％.結論 益生菌誘導的MUC2基因錶達上調可能成為拮抗緻病菌易位的保護機製之一；MUC2基因沉默後,益生菌對E44粘附侵襲腸上皮細胞的抑製作用明顯降低.
목적 관찰익생균유도적유서결장MUC2기인적표체급기대익생균억제E.coli K1주E44점부침습장병장작용적영향.방법 SD유서분별용익생균、E44주화익생균+E44주삼조관위7d후,RT-PCR법관찰익생균화E44주유도결장MUC2기인적표체；파향MUC2기인적shRNA진핵질립표체재체(shRNA MUC2)화음성대조shRNA NC전염인결장암Lovo세포,형광정량PCR법검측기표체수평,병통과경쟁성배척방법검측MUC2기인대익생균길항치병균E44점부침습적영향.결과 관위익생균조SD유서장도MUC2기인명현상조,이E44조칙현저강저.용shRNA MUC2전염Lovo세포후,여음성대조조화공백대조조상비,기표체수평명현강저,간우솔위66.7％；익생균대E44주점부침습억제작용명현저우미처리조,여대조조상비,E44상대점부솔위56.64％,상대침습솔위66.64％.결론 익생균유도적MUC2기인표체상조가능성위길항치병균역위적보호궤제지일；MUC2기인침묵후,익생균대E44점부침습장상피세포적억제작용명현강저.
