南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
2期
172-176
,共5页
宋思捷%朱叶芳%党姗姗%王少雯%华子瑜
宋思捷%硃葉芳%黨姍姍%王少雯%華子瑜
송사첩%주협방%당산산%왕소문%화자유
胆红素%海马神经元%核因子-κB%凋亡%TAT-NBD
膽紅素%海馬神經元%覈因子-κB%凋亡%TAT-NBD
담홍소%해마신경원%핵인자-κB%조망%TAT-NBD
目的 明确核因子-κB (NF-κB)活化在胆红素诱导大鼠海马神经元凋亡中的作用,及反式激活蛋白-NEMO结合域(TAT-NBD)对胆红素神经毒性的干预作用.方法 原代培养海马神经元分为对照组、胆红素组、TAT-NBD早期干预组、持续干预组及晚期干预组.免疫细胞化学法检测NF-κB p65蛋白表达,改良MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法及TUNEL法检测细胞相对存活率及凋亡率,ELISA法检测原代培养基上清IL-1β水平.结果胆红素组海马神经元NF-κB p65蛋白平均光密度值(MOD)明显高于对照组(P＜0.01),6、24 h达高峰.TAT-NBD早期干预组细胞相对存活率为(80.784±9.767)％低于对照组(P＜0.01)、高于胆红素组(P＜0.01),细胞凋亡率为(14.100±2.252)％(Annexin V-FITC/PI双染法)、(12.883+1.629)％(TUNEL法)高于对照组(P＜0.01)、低于胆红素组(P＜0.01),IL-1β水平为15.348±4±0.812 pg/ml低于胆红素组(P＜0.05).TAT-NBD持续干预及晚期干预组细胞存活率、凋亡率、IL-1β水平与胆红素组无显著性差异(P＞0.05).结论 NF-κB双向调控胆红素诱导的海马神经元凋亡.TAT-NBD抑制NF-κB早期高峰有神经保护作用,有可能用于胆红素脑损伤的预防.
目的 明確覈因子-κB (NF-κB)活化在膽紅素誘導大鼠海馬神經元凋亡中的作用,及反式激活蛋白-NEMO結閤域(TAT-NBD)對膽紅素神經毒性的榦預作用.方法 原代培養海馬神經元分為對照組、膽紅素組、TAT-NBD早期榦預組、持續榦預組及晚期榦預組.免疫細胞化學法檢測NF-κB p65蛋白錶達,改良MTT法、Annexin V-FITC/PI雙染法及TUNEL法檢測細胞相對存活率及凋亡率,ELISA法檢測原代培養基上清IL-1β水平.結果膽紅素組海馬神經元NF-κB p65蛋白平均光密度值(MOD)明顯高于對照組(P＜0.01),6、24 h達高峰.TAT-NBD早期榦預組細胞相對存活率為(80.784±9.767)％低于對照組(P＜0.01)、高于膽紅素組(P＜0.01),細胞凋亡率為(14.100±2.252)％(Annexin V-FITC/PI雙染法)、(12.883+1.629)％(TUNEL法)高于對照組(P＜0.01)、低于膽紅素組(P＜0.01),IL-1β水平為15.348±4±0.812 pg/ml低于膽紅素組(P＜0.05).TAT-NBD持續榦預及晚期榦預組細胞存活率、凋亡率、IL-1β水平與膽紅素組無顯著性差異(P＞0.05).結論 NF-κB雙嚮調控膽紅素誘導的海馬神經元凋亡.TAT-NBD抑製NF-κB早期高峰有神經保護作用,有可能用于膽紅素腦損傷的預防.
목적 명학핵인자-κB (NF-κB)활화재담홍소유도대서해마신경원조망중적작용,급반식격활단백-NEMO결합역(TAT-NBD)대담홍소신경독성적간예작용.방법 원대배양해마신경원분위대조조、담홍소조、TAT-NBD조기간예조、지속간예조급만기간예조.면역세포화학법검측NF-κB p65단백표체,개량MTT법、Annexin V-FITC/PI쌍염법급TUNEL법검측세포상대존활솔급조망솔,ELISA법검측원대배양기상청IL-1β수평.결과담홍소조해마신경원NF-κB p65단백평균광밀도치(MOD)명현고우대조조(P＜0.01),6、24 h체고봉.TAT-NBD조기간예조세포상대존활솔위(80.784±9.767)％저우대조조(P＜0.01)、고우담홍소조(P＜0.01),세포조망솔위(14.100±2.252)％(Annexin V-FITC/PI쌍염법)、(12.883+1.629)％(TUNEL법)고우대조조(P＜0.01)、저우담홍소조(P＜0.01),IL-1β수평위15.348±4±0.812 pg/ml저우담홍소조(P＜0.05).TAT-NBD지속간예급만기간예조세포존활솔、조망솔、IL-1β수평여담홍소조무현저성차이(P＞0.05).결론 NF-κB쌍향조공담홍소유도적해마신경원조망.TAT-NBD억제NF-κB조기고봉유신경보호작용,유가능용우담홍소뇌손상적예방.
