实用疼痛学杂志
實用疼痛學雜誌
실용동통학잡지
PAIN CLINIC JOURNAL
2012年
4期
247-250
,共4页
强啡肽%腺病毒%干细胞
彊啡肽%腺病毒%榦細胞
강배태%선병독%간세포
目的 建立前强啡肽(PDP)基因修饰的人骨髓间充质干细胞株并验证其可在体外增强细胞强啡肽的分泌.方法 本实验运用载体Ad5F35-PDP转染人骨髓间充质干细胞hBMSCs,获得分泌强啡肽的干细胞株(hBMSCs-PDP),以转染空载体的细胞(hBMSCs-空载体)和未转染的细胞hBMSCs作为对照,此3组细胞分别采用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD44、CD34、CD45的表达,免疫荧光法检测强啡肽的表达,RT-PCR法检测强啡肽mRNA的表达、Western Blot法测定强啡肽蛋白的分泌.结果 体外实验以流式细胞仪检测此3组细胞的表面标志物CD29、CD44表达均阳性,CD34、CD45表达均阴性且这3组细胞的表达差异比较无统计学意义(P＞0.05).与hBMSCs和hBMSCs-空载体比较,hBMSCs-PDP细胞株强啡肽mRNA的表达和强啡肽蛋白的表达均上调(P＜0.05).结论 本实验成功构建了前强啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞,并证明转染后的细胞株hBMSCs-PDP可稳定分泌强啡肽并保留干细胞原有的特征表型.
目的 建立前彊啡肽(PDP)基因脩飾的人骨髓間充質榦細胞株併驗證其可在體外增彊細胞彊啡肽的分泌.方法 本實驗運用載體Ad5F35-PDP轉染人骨髓間充質榦細胞hBMSCs,穫得分泌彊啡肽的榦細胞株(hBMSCs-PDP),以轉染空載體的細胞(hBMSCs-空載體)和未轉染的細胞hBMSCs作為對照,此3組細胞分彆採用流式細胞儀檢測細胞錶麵抗原CD29、CD44、CD34、CD45的錶達,免疫熒光法檢測彊啡肽的錶達,RT-PCR法檢測彊啡肽mRNA的錶達、Western Blot法測定彊啡肽蛋白的分泌.結果 體外實驗以流式細胞儀檢測此3組細胞的錶麵標誌物CD29、CD44錶達均暘性,CD34、CD45錶達均陰性且這3組細胞的錶達差異比較無統計學意義(P＞0.05).與hBMSCs和hBMSCs-空載體比較,hBMSCs-PDP細胞株彊啡肽mRNA的錶達和彊啡肽蛋白的錶達均上調(P＜0.05).結論 本實驗成功構建瞭前彊啡肽基因脩飾的人骨髓間充質榦細胞,併證明轉染後的細胞株hBMSCs-PDP可穩定分泌彊啡肽併保留榦細胞原有的特徵錶型.
목적 건립전강배태(PDP)기인수식적인골수간충질간세포주병험증기가재체외증강세포강배태적분비.방법 본실험운용재체Ad5F35-PDP전염인골수간충질간세포hBMSCs,획득분비강배태적간세포주(hBMSCs-PDP),이전염공재체적세포(hBMSCs-공재체)화미전염적세포hBMSCs작위대조,차3조세포분별채용류식세포의검측세포표면항원CD29、CD44、CD34、CD45적표체,면역형광법검측강배태적표체,RT-PCR법검측강배태mRNA적표체、Western Blot법측정강배태단백적분비.결과 체외실험이류식세포의검측차3조세포적표면표지물CD29、CD44표체균양성,CD34、CD45표체균음성차저3조세포적표체차이비교무통계학의의(P＞0.05).여hBMSCs화hBMSCs-공재체비교,hBMSCs-PDP세포주강배태mRNA적표체화강배태단백적표체균상조(P＜0.05).결론 본실험성공구건료전강배태기인수식적인골수간충질간세포,병증명전염후적세포주hBMSCs-PDP가은정분비강배태병보류간세포원유적특정표형.
