CAJ | 학술논문

目的:探求不同乙醇预处理方式是否对激光显微切割(Laser microdissection,LMD)技术分离获得的小鼠牙胚组织总RNA完整度有影响.以提高LMD技术获取样品的完整度,使之满足后续基因芯片等高通量实验对样品的质检要求.方法:本实验按照LMD切割前是否乙醇预处理的方式分为无预处理LMD组、梯度乙醇处理组以及100％乙醇处理组三组.以LMD技术获取胚胎17天(Embryonic 17,E17)和出生后2天(Postnatal 2,PN2)两时期CD1小鼠下颌第一磨牙的牙胚组织；提取各组总RNA,再以核糖体RNA 28s/18s比值、RNA完整度数值(RNA Integrity Number,RIN),以及样品电泳图的图形来综合判断样品完整度.数据进行统计分析.结果:100％乙醇处理组,RIN值最高且与另两组相比差异有显著性,梯度乙醇处理组RIN值与无预处理LMD组相比,并无显著性差异；以28s/18s比值为指标,100％乙醇预处理组高于其它两组,但差异并无显著性;梯度乙醇处理组与无预处理LMD组间差异亦无统计学意义.结论:100％乙醇直接处理方式更适合用于LMD切割样品的防降解预处理,可显著减少切割过程中的组织RNA完整度破坏.该步操作将有利于获得符合高通量实验质检标准的芯片实验样本.
목적:탐구불동을순예처리방식시부대격광현미절할(Laser microdissection,LMD)기술분리획득적소서아배조직총RNA완정도유영향.이제고LMD기술획취양품적완정도,사지만족후속기인심편등고통량실험대양품적질검요구.방법:본실험안조LMD절할전시부을순예처리적방식분위무예처리LMD조、제도을순처리조이급100％을순처리조삼조.이LMD기술획취배태17천(Embryonic 17,E17)화출생후2천(Postnatal 2,PN2)량시기CD1소서하합제일마아적아배조직；제취각조총RNA,재이핵당체RNA 28s/18s비치、RNA완정도수치(RNA Integrity Number,RIN),이급양품전영도적도형래종합판단양품완정도.수거진행통계분석.결과:100％을순처리조,RIN치최고차여령량조상비차이유현저성,제도을순처리조RIN치여무예처리LMD조상비,병무현저성차이；이28s/18s비치위지표,100％을순예처리조고우기타량조,단차이병무현저성;제도을순처리조여무예처리LMD조간차이역무통계학의의.결론:100％을순직접처리방식경괄합용우LMD절할양품적방강해예처리,가현저감소절할과정중적조직RNA완정도파배.해보조작장유리우획득부합고통량실험질검표준적심편실험양본.