东华大学学报（自然科学版）
東華大學學報（自然科學版）
동화대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF DONGHUA UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2013年
2期
202-206,213
,共6页
生物催化%番红菌素%甲基转移酶%酪氨酸%3-甲基酪氨酸
生物催化%番紅菌素%甲基轉移酶%酪氨痠%3-甲基酪氨痠
생물최화%번홍균소%갑기전이매%락안산%3-갑기락안산
研究了番红菌素生物合成过程中的一个碳甲基转移酶(SfcF)的酶活反应时间曲线和动力学参数,并证明了其催化功能.通过镍柱亲和层析纯化得到碳甲基转移酶,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定其分子量大小后,以酪氨酸(Tyr)为底物,采用高效液相色谱法(HPLC)检测碳甲基转移酶的生物催化活性并分析得到其酶动力学数据.在碳甲基转移酶的生物催化作用下,可实现酪氨酸羟基邻位碳的甲基化,得到3-甲基酪氨酸.通过时间曲线的测定,发现反应时间在50 min以内,酪氨酸浓度低于400μmol/L时,底物的转化率与时间呈线性变化.通过碳甲基转移酶的活性检测和动力学常数的测定,为深入研究番红菌素的生物合成机制奠定了基础,并为其结构类似物ET-743(成药)的合成研究提供有益参考.
研究瞭番紅菌素生物閤成過程中的一箇碳甲基轉移酶(SfcF)的酶活反應時間麯線和動力學參數,併證明瞭其催化功能.通過鎳柱親和層析純化得到碳甲基轉移酶,用聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)鑒定其分子量大小後,以酪氨痠(Tyr)為底物,採用高效液相色譜法(HPLC)檢測碳甲基轉移酶的生物催化活性併分析得到其酶動力學數據.在碳甲基轉移酶的生物催化作用下,可實現酪氨痠羥基鄰位碳的甲基化,得到3-甲基酪氨痠.通過時間麯線的測定,髮現反應時間在50 min以內,酪氨痠濃度低于400μmol/L時,底物的轉化率與時間呈線性變化.通過碳甲基轉移酶的活性檢測和動力學常數的測定,為深入研究番紅菌素的生物閤成機製奠定瞭基礎,併為其結構類似物ET-743(成藥)的閤成研究提供有益參攷.
연구료번홍균소생물합성과정중적일개탄갑기전이매(SfcF)적매활반응시간곡선화동역학삼수,병증명료기최화공능.통과얼주친화층석순화득도탄갑기전이매,용취병희선알응효전영(SDS-PAGE)감정기분자량대소후,이락안산(Tyr)위저물,채용고효액상색보법(HPLC)검측탄갑기전이매적생물최화활성병분석득도기매동역학수거.재탄갑기전이매적생물최화작용하,가실현락안산간기린위탄적갑기화,득도3-갑기락안산.통과시간곡선적측정,발현반응시간재50 min이내,락안산농도저우400μmol/L시,저물적전화솔여시간정선성변화.통과탄갑기전이매적활성검측화동역학상수적측정,위심입연구번홍균소적생물합성궤제전정료기출,병위기결구유사물ET-743(성약)적합성연구제공유익삼고.
