昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2013年
3期
15-17
,共3页
周婷婷%杨延磊%筎金%李力燕
週婷婷%楊延磊%筎金%李力燕
주정정%양연뢰%여금%리력연
定量PCR%琼脂糖凝胶电泳%mRNA定量
定量PCR%瓊脂糖凝膠電泳%mRNA定量
정량PCR%경지당응효전영%mRNA정량
目的 研究定量PCR模板使用浓度对产物量的影响,对如何改善定量PCR技术进行一些探讨.方法 分别用1×浓度和1/10×浓度逆转录产物(cDNA)进行递增量的梯度PCR反应(0.5 μL、1μL、2μL、4μL),观察其不同量之间变化的灵敏性；进一步增大样本量,来观察这两个浓度级别分辨两倍量差距(1μL和2μL)的能力.结果 在梯度实验中,1/10×浓度的模板表现出了明显的线性关系(R2=0.9105),即产物量随模板使用量的增加而增加,而1X浓度的模板却没有表现出来(R2=0.2488).此外,1/10×浓度的模板有效的区分出了两倍量的差距(1μL组和2 μL组之间,t=3.329,P＜ 0.05)而1x浓度的模板却没有.结论 进行定量PCR时,不同的模板浓度对PCR产物量有一定影响的；选择适当的模板浓度是十分必要.
目的 研究定量PCR模闆使用濃度對產物量的影響,對如何改善定量PCR技術進行一些探討.方法 分彆用1×濃度和1/10×濃度逆轉錄產物(cDNA)進行遞增量的梯度PCR反應(0.5 μL、1μL、2μL、4μL),觀察其不同量之間變化的靈敏性；進一步增大樣本量,來觀察這兩箇濃度級彆分辨兩倍量差距(1μL和2μL)的能力.結果 在梯度實驗中,1/10×濃度的模闆錶現齣瞭明顯的線性關繫(R2=0.9105),即產物量隨模闆使用量的增加而增加,而1X濃度的模闆卻沒有錶現齣來(R2=0.2488).此外,1/10×濃度的模闆有效的區分齣瞭兩倍量的差距(1μL組和2 μL組之間,t=3.329,P＜ 0.05)而1x濃度的模闆卻沒有.結論 進行定量PCR時,不同的模闆濃度對PCR產物量有一定影響的；選擇適噹的模闆濃度是十分必要.
목적 연구정량PCR모판사용농도대산물량적영향,대여하개선정량PCR기술진행일사탐토.방법 분별용1×농도화1/10×농도역전록산물(cDNA)진행체증량적제도PCR반응(0.5 μL、1μL、2μL、4μL),관찰기불동량지간변화적령민성；진일보증대양본량,래관찰저량개농도급별분변량배량차거(1μL화2μL)적능력.결과 재제도실험중,1/10×농도적모판표현출료명현적선성관계(R2=0.9105),즉산물량수모판사용량적증가이증가,이1X농도적모판각몰유표현출래(R2=0.2488).차외,1/10×농도적모판유효적구분출료량배량적차거(1μL조화2 μL조지간,t=3.329,P＜ 0.05)이1x농도적모판각몰유.결론 진행정량PCR시,불동적모판농도대PCR산물량유일정영향적；선택괄당적모판농도시십분필요.
