新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
12期
2263-2268
,共6页
郝晓燕%张毓露%足木热木%刘小利%黄全生
郝曉燕%張毓露%足木熱木%劉小利%黃全生
학효연%장육로%족목열목%류소리%황전생
盐穗木%HcPS_H基因%真核表达载体%重组质粒构建
鹽穗木%HcPS_H基因%真覈錶達載體%重組質粒構建
염수목%HcPS_H기인%진핵표체재체%중조질립구건
[目的]盐穗木(Halostachys caspica)属藜科盐生植物,是广泛分布于新疆干旱或半干旱荒漠盐碱环境中的一种极端耐盐的多年生稀盐多汁半灌木,对盐分适应性极强.PS_H基因是一个参与光合反应光系统的基因,在植物光合作用中起着重要的作用.构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体对于了解该基因在盐穗木耐盐过程中的作用有着重要意义.[方法]利用PCR技术扩增得到大小为441 bp的盐穗木HcPS_H基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒HcPS_H-5N.[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒HcPS_H-5N构建成功.制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功.[结论]成功构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体,并且能在真核细胞中正常表达.
[目的]鹽穗木(Halostachys caspica)屬藜科鹽生植物,是廣汎分佈于新疆榦旱或半榦旱荒漠鹽堿環境中的一種極耑耐鹽的多年生稀鹽多汁半灌木,對鹽分適應性極彊.PS_H基因是一箇參與光閤反應光繫統的基因,在植物光閤作用中起著重要的作用.構建鹽穗木HcPS_H基因真覈錶達載體對于瞭解該基因在鹽穗木耐鹽過程中的作用有著重要意義.[方法]利用PCR技術擴增得到大小為441 bp的鹽穗木HcPS_H基因,經限製性內切酶SalI和NotI進行消化,將目的基因與真覈錶達質粒pREP-5N連接,穫得重組真覈錶達質粒HcPS_H-5N.[結果]通過菌落PCR、雙酶切及測序等方法進行鑒定,重組真覈錶達質粒HcPS_H-5N構建成功.製備酵母感受態,將重組質粒電擊轉入酵母中,酵母菌落PCR結果顯示電擊轉化成功.[結論]成功構建鹽穗木HcPS_H基因真覈錶達載體,併且能在真覈細胞中正常錶達.
[목적]염수목(Halostachys caspica)속려과염생식물,시엄범분포우신강간한혹반간한황막염감배경중적일충겁단내염적다년생희염다즙반관목,대염분괄응성겁강.PS_H기인시일개삼여광합반응광계통적기인,재식물광합작용중기착중요적작용.구건염수목HcPS_H기인진핵표체재체대우료해해기인재염수목내염과정중적작용유착중요의의.[방법]이용PCR기술확증득도대소위441 bp적염수목HcPS_H기인,경한제성내절매SalI화NotI진행소화,장목적기인여진핵표체질립pREP-5N련접,획득중조진핵표체질립HcPS_H-5N.[결과]통과균락PCR、쌍매절급측서등방법진행감정,중조진핵표체질립HcPS_H-5N구건성공.제비효모감수태,장중조질립전격전입효모중,효모균락PCR결과현시전격전화성공.[결론]성공구건염수목HcPS_H기인진핵표체재체,병차능재진핵세포중정상표체.
