农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
1期
62-68
,共7页
高川%熊显荣%符梅%王树茂%李宇%李键
高川%熊顯榮%符梅%王樹茂%李宇%李鍵
고천%웅현영%부매%왕수무%리우%리건
Scriptaid%组蛋白乙酰化%重编程%异种体细胞核移植
Scriptaid%組蛋白乙酰化%重編程%異種體細胞覈移植
Scriptaid%조단백을선화%중편정%이충체세포핵이식
供体细胞的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因.本研究旨在探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid对牦牛(Bos grunnie ns)成纤维细胞重编程的影响,以及Scriptaid处理供体细胞对牦牛-黄牛(Bos taurus)异种核移植(interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)胚胎体外发育的影响.分别利用0、500、1 000、1 500和3 000 nmol/L Scriptaid处理牦牛胎儿成纤维细胞,观察细胞形态、统计细胞活率、测定细胞周期、检测组蛋白乙酰化水平,并以处理后的成纤维细胞进行体细胞核移植,检测重构胚体外发育水平.结果显示,经Scriptaid处理24 h后,细胞形态发生了改变,细胞增殖受到明显抑制,大量细胞被阻滞在G0/G1期;随着Scriptaid处理浓度的增加,细胞组蛋白H3K9ac乙酰化水平逐渐提高;以1 000nmol/L Scriptaid处理的成纤维细胞作为供体细胞后的囊胚率显著高于其他组(P<0.05).研究结果表明,Scriptaid能显著提高牦牛成纤维细胞的乙酰化水平,以1 000 nmol/L Scriptaid处理供体细胞显著提高了牦牛-黄牛异种克隆胚胎的体外发育.本研究初步证实Scriptaid是通过提高成纤维细胞的乙酰化水平来促进核的重编程,为研究供体细胞的重编程以及异种克隆牦牛提供理论依据.
供體細胞的不完全重編程是剋隆動物成功率低的主要原因.本研究旨在探討組蛋白去乙酰化酶抑製劑Scriptaid對牦牛(Bos grunnie ns)成纖維細胞重編程的影響,以及Scriptaid處理供體細胞對牦牛-黃牛(Bos taurus)異種覈移植(interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)胚胎體外髮育的影響.分彆利用0、500、1 000、1 500和3 000 nmol/L Scriptaid處理牦牛胎兒成纖維細胞,觀察細胞形態、統計細胞活率、測定細胞週期、檢測組蛋白乙酰化水平,併以處理後的成纖維細胞進行體細胞覈移植,檢測重構胚體外髮育水平.結果顯示,經Scriptaid處理24 h後,細胞形態髮生瞭改變,細胞增殖受到明顯抑製,大量細胞被阻滯在G0/G1期;隨著Scriptaid處理濃度的增加,細胞組蛋白H3K9ac乙酰化水平逐漸提高;以1 000nmol/L Scriptaid處理的成纖維細胞作為供體細胞後的囊胚率顯著高于其他組(P<0.05).研究結果錶明,Scriptaid能顯著提高牦牛成纖維細胞的乙酰化水平,以1 000 nmol/L Scriptaid處理供體細胞顯著提高瞭牦牛-黃牛異種剋隆胚胎的體外髮育.本研究初步證實Scriptaid是通過提高成纖維細胞的乙酰化水平來促進覈的重編程,為研究供體細胞的重編程以及異種剋隆牦牛提供理論依據.
공체세포적불완전중편정시극륭동물성공솔저적주요원인.본연구지재탐토조단백거을선화매억제제Scriptaid대모우(Bos grunnie ns)성섬유세포중편정적영향,이급Scriptaid처리공체세포대모우-황우(Bos taurus)이충핵이식(interspecies somatic cell nuclear transfer,iSCNT)배태체외발육적영향.분별이용0、500、1 000、1 500화3 000 nmol/L Scriptaid처리모우태인성섬유세포,관찰세포형태、통계세포활솔、측정세포주기、검측조단백을선화수평,병이처리후적성섬유세포진행체세포핵이식,검측중구배체외발육수평.결과현시,경Scriptaid처리24 h후,세포형태발생료개변,세포증식수도명현억제,대량세포피조체재G0/G1기;수착Scriptaid처리농도적증가,세포조단백H3K9ac을선화수평축점제고;이1 000nmol/L Scriptaid처리적성섬유세포작위공체세포후적낭배솔현저고우기타조(P<0.05).연구결과표명,Scriptaid능현저제고모우성섬유세포적을선화수평,이1 000 nmol/L Scriptaid처리공체세포현저제고료모우-황우이충극륭배태적체외발육.본연구초보증실Scriptaid시통과제고성섬유세포적을선화수평래촉진핵적중편정,위연구공체세포적중편정이급이충극륭모우제공이론의거.