北京工商大学学报（自然科学版）
北京工商大學學報（自然科學版）
북경공상대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF BEIJING TECHNOLOGY AND BUSINESS UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2013年
1期
33-37
,共5页
崔文明%刘鹭%张书文%逄晓阳%李红娟%吕加平
崔文明%劉鷺%張書文%逄曉暘%李紅娟%呂加平
최문명%류로%장서문%방효양%리홍연%려가평
保加利亚乳杆%N-乙酰氨基己糖苷酶%简并引物
保加利亞乳桿%N-乙酰氨基己糖苷酶%簡併引物
보가리아유간%N-을선안기기당감매%간병인물
β-N-乙酰氨基己糖苷酶(β-Hexcase)在细菌、植物和动物中广泛存在,具有典型的外切酶活性并可以催化切除β-N-乙酰氨基己糖的非还原性氨基己糖残基,在细菌细胞分裂中具有重要作用.选取与保加利亚乳杆菌LJJ亲缘关系近的菌种的β-N-乙酰氨基己糖苷酶蛋白序列,利用ICODEHOP和CODEHOP在线简并引物设计软件设计β-Hexcase简并引物,选取Hex1-f和Hex1-r引物对,以LJJ基因组DNA为模板经PCR扩增得到614 bp产物.PCR产物连接pGEM-T质粒载体后克隆至大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆提取质粒进行测序.测序结果显示产物长度为614 bp,该DNA序列经blastx比对发现与其他已知β-Hexcase基因具有相似性,表明所克隆的序列即为LJJ β-Hexcase的基因片段.β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因的获得为进一步研究β-N-乙酰氨基己糖苷酶与保加利亚乳杆菌自溶的关系奠定了基础.
β-N-乙酰氨基己糖苷酶(β-Hexcase)在細菌、植物和動物中廣汎存在,具有典型的外切酶活性併可以催化切除β-N-乙酰氨基己糖的非還原性氨基己糖殘基,在細菌細胞分裂中具有重要作用.選取與保加利亞乳桿菌LJJ親緣關繫近的菌種的β-N-乙酰氨基己糖苷酶蛋白序列,利用ICODEHOP和CODEHOP在線簡併引物設計軟件設計β-Hexcase簡併引物,選取Hex1-f和Hex1-r引物對,以LJJ基因組DNA為模闆經PCR擴增得到614 bp產物.PCR產物連接pGEM-T質粒載體後剋隆至大腸桿菌DH5α中,篩選暘性剋隆提取質粒進行測序.測序結果顯示產物長度為614 bp,該DNA序列經blastx比對髮現與其他已知β-Hexcase基因具有相似性,錶明所剋隆的序列即為LJJ β-Hexcase的基因片段.β-N-乙酰氨基己糖苷酶基因的穫得為進一步研究β-N-乙酰氨基己糖苷酶與保加利亞乳桿菌自溶的關繫奠定瞭基礎.
β-N-을선안기기당감매(β-Hexcase)재세균、식물화동물중엄범존재,구유전형적외절매활성병가이최화절제β-N-을선안기기당적비환원성안기기당잔기,재세균세포분렬중구유중요작용.선취여보가리아유간균LJJ친연관계근적균충적β-N-을선안기기당감매단백서렬,이용ICODEHOP화CODEHOP재선간병인물설계연건설계β-Hexcase간병인물,선취Hex1-f화Hex1-r인물대,이LJJ기인조DNA위모판경PCR확증득도614 bp산물.PCR산물련접pGEM-T질립재체후극륭지대장간균DH5α중,사선양성극륭제취질립진행측서.측서결과현시산물장도위614 bp,해DNA서렬경blastx비대발현여기타이지β-Hexcase기인구유상사성,표명소극륭적서렬즉위LJJ β-Hexcase적기인편단.β-N-을선안기기당감매기인적획득위진일보연구β-N-을선안기기당감매여보가리아유간균자용적관계전정료기출.
