中华老年多器官疾病杂志
中華老年多器官疾病雜誌
중화노년다기관질병잡지
CHINESE JOURNAL OF MULTIPLE ORGAN DISEASES IN THE ELDERLY
2013年
1期
53-57
,共5页
徐海波%王可%杜芸辉%白克华%张苏丽%李笑%刘腾%马新亮%刘慧荣
徐海波%王可%杜蕓輝%白剋華%張囌麗%李笑%劉騰%馬新亮%劉慧榮
서해파%왕가%두예휘%백극화%장소려%리소%류등%마신량%류혜영
衰老%Omi/HtrA2%自噬%心肌细胞
衰老%Omi/HtrA2%自噬%心肌細胞
쇠로%Omi/HtrA2%자서%심기세포
目的 探讨衰老心肌中增加的Omi/HtrA2在心肌细胞自噬中的作用.方法 用D-半乳糖干预胎鼠心肌细胞系H9c2建立衰老细胞模型,β-半乳糖苷酶染色观察细胞的衰老情况,cck8试剂盒检测细胞存活率,并以分析细胞乳酸脱氢酶(Lactic Dehydrogenase,LDH)水平反映其活性；给予Omi/HtrA2特异性抑制剂ucf-101降低Omi/HtrA2活性,构建稳转Omi/HtrA2的H9c2细胞株过表达Omi/HtrA2；采用western blot法测定心肌细胞中Omi/HtrA2、beclinl及LC3-Ⅱ蛋白的表达.结果 (1)与H9c2心肌细胞相比,D-半乳糖诱导的H9c2心肌细胞内β-半乳糖苷酶染色阳性率显著升高[(87.7±3.6％)vs(18.3±2.8％),P＜ 0.01]; cck8结果显示,两组之间无显著性差异(P＞0.05),但D-半乳糖诱导的H9c2心肌细胞中LDH活性明显升高(7.07±0.65 vs 5.93±0.34,P＜ 0.01).(2)与H9c2细胞相比,D-半乳糖诱导的H9c2心肌细胞中Omi/HtrA2蛋白表达升高(P＜0.05),而beclinl表达下降(P＜0.01)；给予ucf-101后,衰老细胞中Omi/HtrA2蛋白表达明显下降(P＜0.05),而beclin1表达则进一步降低(P＜0.01).(3)与H9c2细胞相比,过表达Omi/HtrA2的H9c2心肌细胞Omi/HtrA2蛋白表达增高,LC3-Ⅱ蛋白表达也增高(P＜0.05)；给予过表达Omi/HtrA2的H9c2心肌细胞ucf-101后,LC3-Ⅱ表达下降(P＜0.05).结论 衰老心肌细胞中Omi/HtrA2的表达增加可促进心肌细胞自噬.
目的 探討衰老心肌中增加的Omi/HtrA2在心肌細胞自噬中的作用.方法 用D-半乳糖榦預胎鼠心肌細胞繫H9c2建立衰老細胞模型,β-半乳糖苷酶染色觀察細胞的衰老情況,cck8試劑盒檢測細胞存活率,併以分析細胞乳痠脫氫酶(Lactic Dehydrogenase,LDH)水平反映其活性；給予Omi/HtrA2特異性抑製劑ucf-101降低Omi/HtrA2活性,構建穩轉Omi/HtrA2的H9c2細胞株過錶達Omi/HtrA2；採用western blot法測定心肌細胞中Omi/HtrA2、beclinl及LC3-Ⅱ蛋白的錶達.結果 (1)與H9c2心肌細胞相比,D-半乳糖誘導的H9c2心肌細胞內β-半乳糖苷酶染色暘性率顯著升高[(87.7±3.6％)vs(18.3±2.8％),P＜ 0.01]; cck8結果顯示,兩組之間無顯著性差異(P＞0.05),但D-半乳糖誘導的H9c2心肌細胞中LDH活性明顯升高(7.07±0.65 vs 5.93±0.34,P＜ 0.01).(2)與H9c2細胞相比,D-半乳糖誘導的H9c2心肌細胞中Omi/HtrA2蛋白錶達升高(P＜0.05),而beclinl錶達下降(P＜0.01)；給予ucf-101後,衰老細胞中Omi/HtrA2蛋白錶達明顯下降(P＜0.05),而beclin1錶達則進一步降低(P＜0.01).(3)與H9c2細胞相比,過錶達Omi/HtrA2的H9c2心肌細胞Omi/HtrA2蛋白錶達增高,LC3-Ⅱ蛋白錶達也增高(P＜0.05)；給予過錶達Omi/HtrA2的H9c2心肌細胞ucf-101後,LC3-Ⅱ錶達下降(P＜0.05).結論 衰老心肌細胞中Omi/HtrA2的錶達增加可促進心肌細胞自噬.
목적 탐토쇠로심기중증가적Omi/HtrA2재심기세포자서중적작용.방법 용D-반유당간예태서심기세포계H9c2건립쇠로세포모형,β-반유당감매염색관찰세포적쇠로정황,cck8시제합검측세포존활솔,병이분석세포유산탈경매(Lactic Dehydrogenase,LDH)수평반영기활성；급여Omi/HtrA2특이성억제제ucf-101강저Omi/HtrA2활성,구건은전Omi/HtrA2적H9c2세포주과표체Omi/HtrA2；채용western blot법측정심기세포중Omi/HtrA2、beclinl급LC3-Ⅱ단백적표체.결과 (1)여H9c2심기세포상비,D-반유당유도적H9c2심기세포내β-반유당감매염색양성솔현저승고[(87.7±3.6％)vs(18.3±2.8％),P＜ 0.01]; cck8결과현시,량조지간무현저성차이(P＞0.05),단D-반유당유도적H9c2심기세포중LDH활성명현승고(7.07±0.65 vs 5.93±0.34,P＜ 0.01).(2)여H9c2세포상비,D-반유당유도적H9c2심기세포중Omi/HtrA2단백표체승고(P＜0.05),이beclinl표체하강(P＜0.01)；급여ucf-101후,쇠로세포중Omi/HtrA2단백표체명현하강(P＜0.05),이beclin1표체칙진일보강저(P＜0.01).(3)여H9c2세포상비,과표체Omi/HtrA2적H9c2심기세포Omi/HtrA2단백표체증고,LC3-Ⅱ단백표체야증고(P＜0.05)；급여과표체Omi/HtrA2적H9c2심기세포ucf-101후,LC3-Ⅱ표체하강(P＜0.05).결론 쇠로심기세포중Omi/HtrA2적표체증가가촉진심기세포자서.
