中国脑血管病杂志
中國腦血管病雜誌
중국뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF CEREBROVASCULAR DISEASES
2013年
2期
84-88
,共5页
杨碧莹%马珊珊%潘经锐%纪原%彭晴霞%王艺东
楊碧瑩%馬珊珊%潘經銳%紀原%彭晴霞%王藝東
양벽형%마산산%반경예%기원%팽청하%왕예동
Toll样受体9%小神经胶质细胞%氧葡萄糖剥夺%小鼠
Toll樣受體9%小神經膠質細胞%氧葡萄糖剝奪%小鼠
Toll양수체9%소신경효질세포%양포도당박탈%소서
目的 观察氧葡萄糖剥夺-再恢复(OGDR)对小鼠BV-2小胶质细胞的激活以及Toll样受体9(TLR9)表达的影响 方法 采用OGDR法建立BV-2细胞缺氧、缺糖模型,以常氧培养的BV-2细胞作为对照.使用倒置相差显微镜观察BV-2细胞在OGDR后0、6、12、24、48、72h形态的变化,CCK8法检测OGDR后不同时间点细胞存活率的变化,反转录PCR和Western Blot检测细胞内TLR9 mRNA和蛋白的表达. 结果 ①OGDR后BV-2细胞由原来静止的分枝状变成激活的阿米巴状.②OGDR后,细胞存活率明显下降,0h为对照组的(65.7±9.2)％；12 h下降至最低,为对照组的(44.8±2.3)％,后逐渐升高,48、72 h分别为对照组的(60.8±10.2)％、(72.3±10.0)％.③OGDR后,随着时间的延长,TLR9 mRNA表达逐渐升高,24h达高峰,后逐渐降低,但72 h仍高于0h时间点的表达.TLR9蛋白表达亦呈升高趋势,在72h达高峰.对照组各时间点TLR9 mRNA、TLR9蛋白表达差异均无统计学意义.④相同时间点的比较,OGDR组OGDR后6～72h,TLR9 mRNA表达均明显高于对照组(P＜0.05,或P＜0.01,)；12～72h,TLR9蛋白表达显著高于对照组(P＜0.05,或P＜0.01). 结论 OGDR后BV-2细胞被激活,其细胞内TLR9表达随着时间的延长逐渐增高,可能在脑缺血-再灌注后的炎性反应中,发挥重要作用.
目的 觀察氧葡萄糖剝奪-再恢複(OGDR)對小鼠BV-2小膠質細胞的激活以及Toll樣受體9(TLR9)錶達的影響 方法 採用OGDR法建立BV-2細胞缺氧、缺糖模型,以常氧培養的BV-2細胞作為對照.使用倒置相差顯微鏡觀察BV-2細胞在OGDR後0、6、12、24、48、72h形態的變化,CCK8法檢測OGDR後不同時間點細胞存活率的變化,反轉錄PCR和Western Blot檢測細胞內TLR9 mRNA和蛋白的錶達. 結果 ①OGDR後BV-2細胞由原來靜止的分枝狀變成激活的阿米巴狀.②OGDR後,細胞存活率明顯下降,0h為對照組的(65.7±9.2)％；12 h下降至最低,為對照組的(44.8±2.3)％,後逐漸升高,48、72 h分彆為對照組的(60.8±10.2)％、(72.3±10.0)％.③OGDR後,隨著時間的延長,TLR9 mRNA錶達逐漸升高,24h達高峰,後逐漸降低,但72 h仍高于0h時間點的錶達.TLR9蛋白錶達亦呈升高趨勢,在72h達高峰.對照組各時間點TLR9 mRNA、TLR9蛋白錶達差異均無統計學意義.④相同時間點的比較,OGDR組OGDR後6～72h,TLR9 mRNA錶達均明顯高于對照組(P＜0.05,或P＜0.01,)；12～72h,TLR9蛋白錶達顯著高于對照組(P＜0.05,或P＜0.01). 結論 OGDR後BV-2細胞被激活,其細胞內TLR9錶達隨著時間的延長逐漸增高,可能在腦缺血-再灌註後的炎性反應中,髮揮重要作用.
목적 관찰양포도당박탈-재회복(OGDR)대소서BV-2소효질세포적격활이급Toll양수체9(TLR9)표체적영향 방법 채용OGDR법건립BV-2세포결양、결당모형,이상양배양적BV-2세포작위대조.사용도치상차현미경관찰BV-2세포재OGDR후0、6、12、24、48、72h형태적변화,CCK8법검측OGDR후불동시간점세포존활솔적변화,반전록PCR화Western Blot검측세포내TLR9 mRNA화단백적표체. 결과 ①OGDR후BV-2세포유원래정지적분지상변성격활적아미파상.②OGDR후,세포존활솔명현하강,0h위대조조적(65.7±9.2)％；12 h하강지최저,위대조조적(44.8±2.3)％,후축점승고,48、72 h분별위대조조적(60.8±10.2)％、(72.3±10.0)％.③OGDR후,수착시간적연장,TLR9 mRNA표체축점승고,24h체고봉,후축점강저,단72 h잉고우0h시간점적표체.TLR9단백표체역정승고추세,재72h체고봉.대조조각시간점TLR9 mRNA、TLR9단백표체차이균무통계학의의.④상동시간점적비교,OGDR조OGDR후6～72h,TLR9 mRNA표체균명현고우대조조(P＜0.05,혹P＜0.01,)；12～72h,TLR9단백표체현저고우대조조(P＜0.05,혹P＜0.01). 결론 OGDR후BV-2세포피격활,기세포내TLR9표체수착시간적연장축점증고,가능재뇌결혈-재관주후적염성반응중,발휘중요작용.
