畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
4期
11-13
,共3页
崔连成%周飞%黄志强%童双%黄冬妮%袁远华%宁章勇
崔連成%週飛%黃誌彊%童雙%黃鼕妮%袁遠華%寧章勇
최련성%주비%황지강%동쌍%황동니%원원화%저장용
唾液酸转移酶%三黄鸡%真核表达
唾液痠轉移酶%三黃鷄%真覈錶達
타액산전이매%삼황계%진핵표체
唾液酸转移酶催化机体唾液酸的形成,与流感病毒感染的种属特异性具有密切的关系.以三黄鸡法氏囊组织总RNA为模板,运用RTPCR方法扩增了三黄鸡α-2,3唾液酸转移酶Ⅲ(ST3 GalⅢ)基因.将其克隆到带有加强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的pIRES2真核表达载体中,对重组质粒pIRES2-EGFP-ST3 GalⅢ进行酶切和测序鉴定后,采用阳离子脂质体转染法将重组质粒转染到293T细胞,荧光显微镜和Western blot检测观察其表达情况.结果表明,转染pIRES2-EGFP-ST3 GalⅢ质粒后的细胞,在荧光显微镜下检测到绿色荧光信号,并且通过Westernblot进一步验证了ST3GalⅢ在细胞中的表达.
唾液痠轉移酶催化機體唾液痠的形成,與流感病毒感染的種屬特異性具有密切的關繫.以三黃鷄法氏囊組織總RNA為模闆,運用RTPCR方法擴增瞭三黃鷄α-2,3唾液痠轉移酶Ⅲ(ST3 GalⅢ)基因.將其剋隆到帶有加彊型綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因的pIRES2真覈錶達載體中,對重組質粒pIRES2-EGFP-ST3 GalⅢ進行酶切和測序鑒定後,採用暘離子脂質體轉染法將重組質粒轉染到293T細胞,熒光顯微鏡和Western blot檢測觀察其錶達情況.結果錶明,轉染pIRES2-EGFP-ST3 GalⅢ質粒後的細胞,在熒光顯微鏡下檢測到綠色熒光信號,併且通過Westernblot進一步驗證瞭ST3GalⅢ在細胞中的錶達.
타액산전이매최화궤체타액산적형성,여류감병독감염적충속특이성구유밀절적관계.이삼황계법씨낭조직총RNA위모판,운용RTPCR방법확증료삼황계α-2,3타액산전이매Ⅲ(ST3 GalⅢ)기인.장기극륭도대유가강형록색형광단백(EGFP)보고기인적pIRES2진핵표체재체중,대중조질립pIRES2-EGFP-ST3 GalⅢ진행매절화측서감정후,채용양리자지질체전염법장중조질립전염도293T세포,형광현미경화Western blot검측관찰기표체정황.결과표명,전염pIRES2-EGFP-ST3 GalⅢ질립후적세포,재형광현미경하검측도록색형광신호,병차통과Westernblot진일보험증료ST3GalⅢ재세포중적표체.
