CAJ | 학술논문

目的:通过siRNA技术,阻断结肠癌细胞系HCT116中DEK基因的表达,并研究DEK基因沉默后对HCT116细胞增殖能力影响.方法:用真核转录载体pLKO.1-TRC cloning vector构建针对DEK基因的重组siRNA真核转录载体pLKO.1-siDEK A,pLKO.1-siDEK B和pLKO.1-siDEK C,脂质体法转染结肠癌细胞系HCT116,Western blot检测DEK的表达变化；选择沉默效率最高的载体,采用噻唑蓝(MTT)比色法、克隆形成实验检测转染HCT116细胞在增殖、克隆形成等方面的改变,流式细胞术检测其细胞周期的改变.结果:重组载体pLKO.1-siDEK A有效地阻断了HCT116细胞中DEK基因的表达.pLKO.1-siDEK A转染HCT116细胞后,与对照组相比细胞生长、增殖速度明显减慢(P＜0.05),克隆形成率明显下降；流式细胞术表明DEKsiRNA可导致HCT116细胞G0/G1期阻滞,S期细胞减少.结论:成功构建了可有效沉默DEK基因的siRNA干涉载体,证明沉默DEK基因对人结肠癌HCT116细胞增殖有负性调节作用.本研究为进一步阐明DEK基因在结直肠癌中的作用奠定了基础.
목적:통과siRNA기술,조단결장암세포계HCT116중DEK기인적표체,병연구DEK기인침묵후대HCT116세포증식능력영향.방법:용진핵전록재체pLKO.1-TRC cloning vector구건침대DEK기인적중조siRNA진핵전록재체pLKO.1-siDEK A,pLKO.1-siDEK B화pLKO.1-siDEK C,지질체법전염결장암세포계HCT116,Western blot검측DEK적표체변화；선택침묵효솔최고적재체,채용새서람(MTT)비색법、극륭형성실험검측전염HCT116세포재증식、극륭형성등방면적개변,류식세포술검측기세포주기적개변.결과:중조재체pLKO.1-siDEK A유효지조단료HCT116세포중DEK기인적표체.pLKO.1-siDEK A전염HCT116세포후,여대조조상비세포생장、증식속도명현감만(P＜0.05),극륭형성솔명현하강；류식세포술표명DEKsiRNA가도치HCT116세포G0/G1기조체,S기세포감소.결론:성공구건료가유효침묵DEK기인적siRNA간섭재체,증명침묵DEK기인대인결장암HCT116세포증식유부성조절작용.본연구위진일보천명DEK기인재결직장암중적작용전정료기출.