重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2013年
14期
1571-1574,1577
,共5页
项颖%李启英%王莉%黄德鸿%唐显军%张曼%杨威%吴仙宇%郑晓东
項穎%李啟英%王莉%黃德鴻%唐顯軍%張曼%楊威%吳仙宇%鄭曉東
항영%리계영%왕리%황덕홍%당현군%장만%양위%오선우%정효동
细胞增殖%细胞运动%DC-CIK细胞%肝癌HepG2细胞
細胞增殖%細胞運動%DC-CIK細胞%肝癌HepG2細胞
세포증식%세포운동%DC-CIK세포%간암HepG2세포
目的 探讨经细胞因子从肝癌患者外周血贴壁单个核细胞(PBMCs)诱导的树突状细胞(DC)与杀伤细胞(CIK)对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移的影响.方法 用肝癌患者肝癌组织裂解物(肿瘤抗原)致敏经粒细胞巨噬细胞刺激因子(GMCSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-4(IL-4)等诱导该患者PBMCs产生的DC.用干扰素-γ(IFN-γ)、IL-2和人CD3单克隆抗体(human CD3 monoclonal antibody,hCD3mAb)等诱导该PBMCs的悬浮细胞产生CIK细胞.用Tanswell培养小室将DC-CIK细胞与HepG2细胞在同一培养体系内经该小室膜分隔培养24、48 h.CCK-8法检测HepG2细胞生长变化,并绘制其生长曲线；划痕实验检测其增殖、迁移能力.RT-PCR、Western blot分别检测其增殖细胞核抗原(PCNA)基因及其编码蛋白的表达.结果 CCK-8法检测显示,DC-CIK细胞对人HepG2细胞生长具显著杀伤作用,与对照组细胞比较,差异有统计学意义(P＜0.01).划痕实验、基因与蛋白水平检测表明,DC-CIK细胞可明显抑制该瘤细胞的增殖与迁移,能在基因与蛋白水平下调该瘤细胞PCNA的表达.结论 DC-CIK细胞可显著下调肝癌细胞的PCNA基因表达,明显抑制其增殖与迁移,以发挥其杀瘤作用.
目的 探討經細胞因子從肝癌患者外週血貼壁單箇覈細胞(PBMCs)誘導的樹突狀細胞(DC)與殺傷細胞(CIK)對人肝癌HepG2細胞增殖、遷移的影響.方法 用肝癌患者肝癌組織裂解物(腫瘤抗原)緻敏經粒細胞巨噬細胞刺激因子(GMCSF)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及白細胞介素-4(IL-4)等誘導該患者PBMCs產生的DC.用榦擾素-γ(IFN-γ)、IL-2和人CD3單剋隆抗體(human CD3 monoclonal antibody,hCD3mAb)等誘導該PBMCs的懸浮細胞產生CIK細胞.用Tanswell培養小室將DC-CIK細胞與HepG2細胞在同一培養體繫內經該小室膜分隔培養24、48 h.CCK-8法檢測HepG2細胞生長變化,併繪製其生長麯線；劃痕實驗檢測其增殖、遷移能力.RT-PCR、Western blot分彆檢測其增殖細胞覈抗原(PCNA)基因及其編碼蛋白的錶達.結果 CCK-8法檢測顯示,DC-CIK細胞對人HepG2細胞生長具顯著殺傷作用,與對照組細胞比較,差異有統計學意義(P＜0.01).劃痕實驗、基因與蛋白水平檢測錶明,DC-CIK細胞可明顯抑製該瘤細胞的增殖與遷移,能在基因與蛋白水平下調該瘤細胞PCNA的錶達.結論 DC-CIK細胞可顯著下調肝癌細胞的PCNA基因錶達,明顯抑製其增殖與遷移,以髮揮其殺瘤作用.
목적 탐토경세포인자종간암환자외주혈첩벽단개핵세포(PBMCs)유도적수돌상세포(DC)여살상세포(CIK)대인간암HepG2세포증식、천이적영향.방법 용간암환자간암조직렬해물(종류항원)치민경립세포거서세포자격인자(GMCSF)、종류배사인자-α(TNF-α)급백세포개소-4(IL-4)등유도해환자PBMCs산생적DC.용간우소-γ(IFN-γ)、IL-2화인CD3단극륭항체(human CD3 monoclonal antibody,hCD3mAb)등유도해PBMCs적현부세포산생CIK세포.용Tanswell배양소실장DC-CIK세포여HepG2세포재동일배양체계내경해소실막분격배양24、48 h.CCK-8법검측HepG2세포생장변화,병회제기생장곡선；화흔실험검측기증식、천이능력.RT-PCR、Western blot분별검측기증식세포핵항원(PCNA)기인급기편마단백적표체.결과 CCK-8법검측현시,DC-CIK세포대인HepG2세포생장구현저살상작용,여대조조세포비교,차이유통계학의의(P＜0.01).화흔실험、기인여단백수평검측표명,DC-CIK세포가명현억제해류세포적증식여천이,능재기인여단백수평하조해류세포PCNA적표체.결론 DC-CIK세포가현저하조간암세포적PCNA기인표체,명현억제기증식여천이,이발휘기살류작용.
