浙江师范大学学报（自然科学版）
浙江師範大學學報（自然科學版）
절강사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2013年
1期
101-107
,共7页
张勤%应湾湾%葛丹婷%房跃群%李涛
張勤%應灣灣%葛丹婷%房躍群%李濤
장근%응만만%갈단정%방약군%리도
Nkx2.5%重组腺病毒%心肌细胞%H9c2细胞%凋亡
Nkx2.5%重組腺病毒%心肌細胞%H9c2細胞%凋亡
Nkx2.5%중조선병독%심기세포%H9c2세포%조망
利用AdEasy腺病毒表达系统构建了Nkx2.5重组腺病毒.Nkx2.5基因克隆入pAdTrackcmv质粒,pAdTtrackcmv-Nkx2.5经PmeⅠ线性化后转化含pAdEasy-1的BJ5183菌进行同源重组,以构建pAdEsay-Nkx2.5重组质粒.pAdEsay-Nkx2.5转染293A细胞进行病毒包装.以Ad-Nkx2.5重组腺病毒感染Hela及乳鼠心肌细胞,检测了Nkx2.5蛋白表达及对下游ANF和β-MHC基因的表达调控；并采用感染病毒的H9c2心肌细胞经H2O2处理建立细胞凋亡模型,采用噻唑蓝法和荧光染色法检测了细胞存活率和凋亡细胞的形态变化.结果显示,Nkx2.5过表达能抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡.
利用AdEasy腺病毒錶達繫統構建瞭Nkx2.5重組腺病毒.Nkx2.5基因剋隆入pAdTrackcmv質粒,pAdTtrackcmv-Nkx2.5經PmeⅠ線性化後轉化含pAdEasy-1的BJ5183菌進行同源重組,以構建pAdEsay-Nkx2.5重組質粒.pAdEsay-Nkx2.5轉染293A細胞進行病毒包裝.以Ad-Nkx2.5重組腺病毒感染Hela及乳鼠心肌細胞,檢測瞭Nkx2.5蛋白錶達及對下遊ANF和β-MHC基因的錶達調控；併採用感染病毒的H9c2心肌細胞經H2O2處理建立細胞凋亡模型,採用噻唑藍法和熒光染色法檢測瞭細胞存活率和凋亡細胞的形態變化.結果顯示,Nkx2.5過錶達能抑製H2O2誘導的H9c2細胞凋亡.
이용AdEasy선병독표체계통구건료Nkx2.5중조선병독.Nkx2.5기인극륭입pAdTrackcmv질립,pAdTtrackcmv-Nkx2.5경PmeⅠ선성화후전화함pAdEasy-1적BJ5183균진행동원중조,이구건pAdEsay-Nkx2.5중조질립.pAdEsay-Nkx2.5전염293A세포진행병독포장.이Ad-Nkx2.5중조선병독감염Hela급유서심기세포,검측료Nkx2.5단백표체급대하유ANF화β-MHC기인적표체조공；병채용감염병독적H9c2심기세포경H2O2처리건립세포조망모형,채용새서람법화형광염색법검측료세포존활솔화조망세포적형태변화.결과현시,Nkx2.5과표체능억제H2O2유도적H9c2세포조망.
