中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2013年
4期
118-122
,共5页
陈名红%李玉%刘多%熊华斌%李成云
陳名紅%李玉%劉多%熊華斌%李成雲
진명홍%리옥%류다%웅화빈%리성운
百合属%简单重复间隔序列%反应体系%优化
百閤屬%簡單重複間隔序列%反應體繫%優化
백합속%간단중복간격서렬%반응체계%우화
建立一个稳定性高、重现性好,适合百合ISSR遗传差异分析的PCR反应体系.设定反应体系中各因子的不同浓度并进行PCR扩增,依据稳定性高、重现性好的原则,对该反应体系进行调整与优化,最终建立稳定可靠的ISSR反应体系.适于百合ISSR-PCR反应的最佳体系(25 μL)为:40 ng模板DNA,2.0 mmol/L Mg2+,1.5 UTaqDNA聚合酶,0.8 μmol/L引物,200μmol/L dNTPs;扩增程序为:94℃预变性5min; 94℃变性1 min,51.8℃退火1 min,72℃延伸2 min,共35个循环；最后72℃延伸8 min.所建立的百合ISSR反应体系具有稳定性高、重现性好、检测多态性能力强等特点,为应用ISSR标记技术进行百合属植物遗传多样性分析和品种分子鉴别等研究奠定了技术基础.
建立一箇穩定性高、重現性好,適閤百閤ISSR遺傳差異分析的PCR反應體繫.設定反應體繫中各因子的不同濃度併進行PCR擴增,依據穩定性高、重現性好的原則,對該反應體繫進行調整與優化,最終建立穩定可靠的ISSR反應體繫.適于百閤ISSR-PCR反應的最佳體繫(25 μL)為:40 ng模闆DNA,2.0 mmol/L Mg2+,1.5 UTaqDNA聚閤酶,0.8 μmol/L引物,200μmol/L dNTPs;擴增程序為:94℃預變性5min; 94℃變性1 min,51.8℃退火1 min,72℃延伸2 min,共35箇循環；最後72℃延伸8 min.所建立的百閤ISSR反應體繫具有穩定性高、重現性好、檢測多態性能力彊等特點,為應用ISSR標記技術進行百閤屬植物遺傳多樣性分析和品種分子鑒彆等研究奠定瞭技術基礎.
건립일개은정성고、중현성호,괄합백합ISSR유전차이분석적PCR반응체계.설정반응체계중각인자적불동농도병진행PCR확증,의거은정성고、중현성호적원칙,대해반응체계진행조정여우화,최종건립은정가고적ISSR반응체계.괄우백합ISSR-PCR반응적최가체계(25 μL)위:40 ng모판DNA,2.0 mmol/L Mg2+,1.5 UTaqDNA취합매,0.8 μmol/L인물,200μmol/L dNTPs;확증정서위:94℃예변성5min; 94℃변성1 min,51.8℃퇴화1 min,72℃연신2 min,공35개순배；최후72℃연신8 min.소건립적백합ISSR반응체계구유은정성고、중현성호、검측다태성능력강등특점,위응용ISSR표기기술진행백합속식물유전다양성분석화품충분자감별등연구전정료기술기출.
