激光生物学报
激光生物學報
격광생물학보
ACTA LASER BIOLOGY SINICA
2012年
6期
546-550
,共5页
丁新伦%谢荔岩%潘贤%吴祖建
丁新倫%謝荔巖%潘賢%吳祖建
정신륜%사려암%반현%오조건
水稻齿叶矮缩病毒(RRSV)%Pns10蛋白%原核表达%抗血清制备和应用
水稻齒葉矮縮病毒(RRSV)%Pns10蛋白%原覈錶達%抗血清製備和應用
수도치협왜축병독(RRSV)%Pns10단백%원핵표체%항혈청제비화응용
水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白由基因组片段S10编码.从RRSV福建沙县分离物(RRSV-F)中获取该病毒的全基因组,根据RRSV泰国分离物核苷酸序列设计特异性引物获得S10编码区,利用Directional TOPO克隆技术,将S10连接至克隆表达载体pET100/D-TOPO构建重组质粒,并进行了序列测定和分析.重组质粒经IPTG诱导在BL21star(DE3)E.coli中高效表达约35 kD Pns10蛋白.将Pns10蛋白免疫新西兰大白兔制备了特异性的抗血清,间接ELISA法测定抗血清效价为1:7 680,Western blot 分析表明抗血清特异性强.表达产物及抗血清在Pns10蛋白的结构和功能研究中具有重要的应用价值,制备的抗血清可用于水稻病株和传播介体的检测以及病毒病的诊断.
水稻齒葉矮縮病毒Pns10蛋白由基因組片段S10編碼.從RRSV福建沙縣分離物(RRSV-F)中穫取該病毒的全基因組,根據RRSV泰國分離物覈苷痠序列設計特異性引物穫得S10編碼區,利用Directional TOPO剋隆技術,將S10連接至剋隆錶達載體pET100/D-TOPO構建重組質粒,併進行瞭序列測定和分析.重組質粒經IPTG誘導在BL21star(DE3)E.coli中高效錶達約35 kD Pns10蛋白.將Pns10蛋白免疫新西蘭大白兔製備瞭特異性的抗血清,間接ELISA法測定抗血清效價為1:7 680,Western blot 分析錶明抗血清特異性彊.錶達產物及抗血清在Pns10蛋白的結構和功能研究中具有重要的應用價值,製備的抗血清可用于水稻病株和傳播介體的檢測以及病毒病的診斷.
수도치협왜축병독Pns10단백유기인조편단S10편마.종RRSV복건사현분리물(RRSV-F)중획취해병독적전기인조,근거RRSV태국분리물핵감산서렬설계특이성인물획득S10편마구,이용Directional TOPO극륭기술,장S10련접지극륭표체재체pET100/D-TOPO구건중조질립,병진행료서렬측정화분석.중조질립경IPTG유도재BL21star(DE3)E.coli중고효표체약35 kD Pns10단백.장Pns10단백면역신서란대백토제비료특이성적항혈청,간접ELISA법측정항혈청효개위1:7 680,Western blot 분석표명항혈청특이성강.표체산물급항혈청재Pns10단백적결구화공능연구중구유중요적응용개치,제비적항혈청가용우수도병주화전파개체적검측이급병독병적진단.
