检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2013年
1期
61-66
,共6页
梁华%梁友宝%贺文欣%杨军平%孙国宏%杨小军%李柏青
樑華%樑友寶%賀文訢%楊軍平%孫國宏%楊小軍%李柏青
량화%량우보%하문흔%양군평%손국굉%양소군%리백청
白细胞介素22%白细胞介素17%淋巴细胞%结核病%流式细胞术
白細胞介素22%白細胞介素17%淋巴細胞%結覈病%流式細胞術
백세포개소22%백세포개소17%림파세포%결핵병%류식세포술
目的 建立用流式细胞术(FCM)检测人外周血产白细胞介素22(IL-22)的不同淋巴细胞亚群的方法,并探讨其在结核病(TB)患者中的应用,以了解产IL-22的淋巴细胞亚群在抗结核感染免疫中的作用.方法 采集22例TB患者和18名健康对照者外周血,与相同体积RPMI-1640培养液混匀,加入佛波醇酯(PMA)和钙离子霉素,混匀后于37 ℃ 5% CO2静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h,收集细胞,用荧光素标记进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的不同淋巴细胞亚群比例.结果 PMA浓度为100 ng/mL,钙离子霉素浓度为1 μg/mL,刺激培养2 h可最有效刺激IL-22的产生;TB患者外周血中产IL-22的γδT细胞比例(7.37%)明显高于正常人(1.81%,P<0.05),而在CD4+T、CD8+T、自然杀伤(NK)细胞和B细胞等其他细胞亚群中,产IL-22的阳性细胞比例在TB患者和健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05);Th22和Th17细胞比例在TB患者和健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05).结论建立了一套简便、完整、可靠的FCM检测产IL-22的淋巴细胞亚群的方法,产IL-22的γδT细胞在抗结核感染免疫中可能发挥免疫效应.
目的 建立用流式細胞術(FCM)檢測人外週血產白細胞介素22(IL-22)的不同淋巴細胞亞群的方法,併探討其在結覈病(TB)患者中的應用,以瞭解產IL-22的淋巴細胞亞群在抗結覈感染免疫中的作用.方法 採集22例TB患者和18名健康對照者外週血,與相同體積RPMI-1640培養液混勻,加入彿波醇酯(PMA)和鈣離子黴素,混勻後于37 ℃ 5% CO2靜置培養2 h,再加入莫能黴素後繼續培養4 h,收集細胞,用熒光素標記進行細胞錶麵抗原和胞內細胞因子染色,用FCM檢測錶達IL-22、IL-17的不同淋巴細胞亞群比例.結果 PMA濃度為100 ng/mL,鈣離子黴素濃度為1 μg/mL,刺激培養2 h可最有效刺激IL-22的產生;TB患者外週血中產IL-22的γδT細胞比例(7.37%)明顯高于正常人(1.81%,P<0.05),而在CD4+T、CD8+T、自然殺傷(NK)細胞和B細胞等其他細胞亞群中,產IL-22的暘性細胞比例在TB患者和健康對照者之間差異無統計學意義(P>0.05);Th22和Th17細胞比例在TB患者和健康對照者之間差異無統計學意義(P>0.05).結論建立瞭一套簡便、完整、可靠的FCM檢測產IL-22的淋巴細胞亞群的方法,產IL-22的γδT細胞在抗結覈感染免疫中可能髮揮免疫效應.
목적 건립용류식세포술(FCM)검측인외주혈산백세포개소22(IL-22)적불동림파세포아군적방법,병탐토기재결핵병(TB)환자중적응용,이료해산IL-22적림파세포아군재항결핵감염면역중적작용.방법 채집22례TB환자화18명건강대조자외주혈,여상동체적RPMI-1640배양액혼균,가입불파순지(PMA)화개리자매소,혼균후우37 ℃ 5% CO2정치배양2 h,재가입막능매소후계속배양4 h,수집세포,용형광소표기진행세포표면항원화포내세포인자염색,용FCM검측표체IL-22、IL-17적불동림파세포아군비례.결과 PMA농도위100 ng/mL,개리자매소농도위1 μg/mL,자격배양2 h가최유효자격IL-22적산생;TB환자외주혈중산IL-22적γδT세포비례(7.37%)명현고우정상인(1.81%,P<0.05),이재CD4+T、CD8+T、자연살상(NK)세포화B세포등기타세포아군중,산IL-22적양성세포비례재TB환자화건강대조자지간차이무통계학의의(P>0.05);Th22화Th17세포비례재TB환자화건강대조자지간차이무통계학의의(P>0.05).결론건립료일투간편、완정、가고적FCM검측산IL-22적림파세포아군적방법,산IL-22적γδT세포재항결핵감염면역중가능발휘면역효응.
