CAJ | 학술논문

目的:研究去氢骆驼蓬碱体外诱导HepG2细胞凋亡过程中c-Jun N末端激酶(JNK)途径的作用,并观察其联合化疗药物对HepG2细胞的影响.方法:CCK-8法检测联合或不联合使用JNK特异性抑制剂SP600125对细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验观察不同浓度药物对细胞克隆形成的影响;Hoechst 33258染色法观察细胞形态变化;PI单染检测细胞亚二倍体率;Annexin V-PI双染测定细胞早期凋亡水平;Western blotting检测细胞聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、JNK和p-JNK蛋白表达的改变;联合5-氟尿嘧啶(5-FU)或顺铂(DDP)观察细胞对化疗药物的敏感性.结果:去氢骆驼蓬碱随药物浓度的升高而抑制作用增强,48 h后IC50为9.80 mg/L;去氢骆驼蓬碱能显著抑制细胞克隆形成,并且导致细胞凋亡形态学变化;PI单染检测发现细胞周期的G1期前有亚二倍体凋亡峰,Annexin V-PI 双染检测细胞出现明显的早期凋亡细胞群;Western blotting检测到随着去氢骆驼蓬碱浓度增加PARP及p-JNK蛋白表达增加,JNK蛋白表达减少;联合使用SP600125对细胞增殖的抑制作用减弱;联合5-FU或顺铂明显增强化疗药物对肿瘤细胞的抑制作用,增敏倍数分别为1.47和5.78倍.结论:去氢骆驼蓬碱对HepG2细胞有增殖抑制作用,并诱导其凋亡,激活JNK信号通路可能是其主要机制之一;同时去氢骆驼蓬碱可以增强HepG2细胞对5-FU和顺铂的敏感性.
목적:연구거경락타봉감체외유도HepG2세포조망과정중c-Jun N말단격매(JNK)도경적작용,병관찰기연합화료약물대HepG2세포적영향.방법:CCK-8법검측연합혹불연합사용JNK특이성억제제SP600125대세포증식적억제작용;극륭형성실험관찰불동농도약물대세포극륭형성적영향;Hoechst 33258염색법관찰세포형태변화;PI단염검측세포아이배체솔;Annexin V-PI쌍염측정세포조기조망수평;Western blotting검측세포취(ADP-핵당)취합매(PARP)、JNK화p-JNK단백표체적개변;연합5-불뇨밀정(5-FU)혹순박(DDP)관찰세포대화료약물적민감성.결과:거경락타봉감수약물농도적승고이억제작용증강,48 h후IC50위9.80 mg/L;거경락타봉감능현저억제세포극륭형성,병차도치세포조망형태학변화;PI단염검측발현세포주기적G1기전유아이배체조망봉,Annexin V-PI 쌍염검측세포출현명현적조기조망세포군;Western blotting검측도수착거경락타봉감농도증가PARP급p-JNK단백표체증가,JNK단백표체감소;연합사용SP600125대세포증식적억제작용감약;연합5-FU혹순박명현증강화료약물대종류세포적억제작용,증민배수분별위1.47화5.78배.결론:거경락타봉감대HepG2세포유증식억제작용,병유도기조망,격활JNK신호통로가능시기주요궤제지일;동시거경락타봉감가이증강HepG2세포대5-FU화순박적민감성.