CAJ | 학술논문

目的:探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在胰岛素促进的血管平滑肌细胞迁移和增殖中的作用及分子机制.方法:采用原代培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞,应用DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS的生成;应用实时定量PCR、Western blotting和ELISA法检测mRNA和蛋白的表达;应用转染报告基因的方法检测基因的转录活性;划痕法测定细胞迁移;CCK-8法测定细胞增殖.结果:胰岛素处理后血管平滑肌细胞内ROS产生明显增加.过氧化氢酶和NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘鎓(DPI)明显抑制胰岛素促进的ROS生成及p-Akt、p-p70S6K1和p-ERK1/2蛋白的表达.过氧化氢酶和DPI明显降低胰岛素促进的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA和蛋白表达及转录激活.抑制ROS产生明显抑制胰岛素刺激的血管平滑肌细胞迁移和增殖.结论:胰岛素通过NADPH氧化酶途径促进血管平滑肌细胞ROS产生.ROS介导了胰岛素促进的Akt/p70S6K1和ERK信号通路的激活、VEGF表达及血管平滑肌细胞的迁移和增殖.
목적:탐토활성양(reactive oxygen species,ROS)재이도소촉진적혈관평활기세포천이화증식중적작용급분자궤제.방법:채용원대배양적대서주동맥혈관평활기세포,응용DCF-DA형광탐침검측세포내ROS적생성;응용실시정량PCR、Western blotting화ELISA법검측mRNA화단백적표체;응용전염보고기인적방법검측기인적전록활성;화흔법측정세포천이;CCK-8법측정세포증식.결과:이도소처리후혈관평활기세포내ROS산생명현증가.과양화경매화NADPH양화매억제제이아분기전옹(DPI)명현억제이도소촉진적ROS생성급p-Akt、p-p70S6K1화p-ERK1/2단백적표체.과양화경매화DPI명현강저이도소촉진적혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)적mRNA화단백표체급전록격활.억제ROS산생명현억제이도소자격적혈관평활기세포천이화증식.결론:이도소통과NADPH양화매도경촉진혈관평활기세포ROS산생.ROS개도료이도소촉진적Akt/p70S6K1화ERK신호통로적격활、VEGF표체급혈관평활기세포적천이화증식.