微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2012年
6期
29-32
,共4页
王美莲%刘兵%史俊岩%郑兰艳%罗恩杰
王美蓮%劉兵%史俊巖%鄭蘭豔%囉恩傑
왕미련%류병%사준암%정란염%라은걸
汉坦病毒%G2蛋白%原核表达载体%蛋白表达
漢坦病毒%G2蛋白%原覈錶達載體%蛋白錶達
한탄병독%G2단백%원핵표체재체%단백표체
实验以汉坦病毒76-118株M基因为模板进行PCR扩增得到含完整编码汉坦病毒G2蛋白基因M2的1 600 bp DNA片段,将此基因片段重组到T载体pMD18中,转化至大肠埃希菌DH5α后,筛选阳性菌落扩增培养,提取重组质粒,双酶切鉴定后,克隆至表达载体pGEX-6P-1-M2,亲和层析法纯化融合蛋白,产物进行Western-Blot鉴定.实验证实通过以质粒pGEX-6P-1为载体,可构建编码汉坦病毒76-118株包膜糖蛋白G2的M2基因的原核表达载体pGEX-6P-1-M2,并可观察G2蛋白在原核细胞中的表达.
實驗以漢坦病毒76-118株M基因為模闆進行PCR擴增得到含完整編碼漢坦病毒G2蛋白基因M2的1 600 bp DNA片段,將此基因片段重組到T載體pMD18中,轉化至大腸埃希菌DH5α後,篩選暘性菌落擴增培養,提取重組質粒,雙酶切鑒定後,剋隆至錶達載體pGEX-6P-1-M2,親和層析法純化融閤蛋白,產物進行Western-Blot鑒定.實驗證實通過以質粒pGEX-6P-1為載體,可構建編碼漢坦病毒76-118株包膜糖蛋白G2的M2基因的原覈錶達載體pGEX-6P-1-M2,併可觀察G2蛋白在原覈細胞中的錶達.
실험이한탄병독76-118주M기인위모판진행PCR확증득도함완정편마한탄병독G2단백기인M2적1 600 bp DNA편단,장차기인편단중조도T재체pMD18중,전화지대장애희균DH5α후,사선양성균락확증배양,제취중조질립,쌍매절감정후,극륭지표체재체pGEX-6P-1-M2,친화층석법순화융합단백,산물진행Western-Blot감정.실험증실통과이질립pGEX-6P-1위재체,가구건편마한탄병독76-118주포막당단백G2적M2기인적원핵표체재체pGEX-6P-1-M2,병가관찰G2단백재원핵세포중적표체.
