湖北医药学院学报
湖北醫藥學院學報
호북의약학원학보
JOURNAL OF HUBAI UNIVERSITY OF MEDICINE
2012年
6期
453-457
,共5页
孟忠吉%张永红%汤守兵%柯昌征%李东%陈悦
孟忠吉%張永紅%湯守兵%柯昌徵%李東%陳悅
맹충길%장영홍%탕수병%가창정%리동%진열
乙型肝炎病毒%RNA干扰%小干扰性RNA%核酸内切酶制备的siRNA
乙型肝炎病毒%RNA榦擾%小榦擾性RNA%覈痠內切酶製備的siRNA
을형간염병독%RNA간우%소간우성RNA%핵산내절매제비적siRNA
目的:研究核酸内切酶制备的siRNA(esiRNA)对HBV基因表达和复制的抑制作用.方法:利用分子生物学方法制备了分别针对HBV S基因和C基因的esiRNA(SesiRNA、CesiRNA),与HBV复制型质粒pHY106+ wta共转染HepG2细胞,化学发光微粒免疫分析方法检测细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg,Northern和Southern印迹检测HBV的mRNA和病毒复制中间体水平.结果:EsiRNA特异抑制HBV基因表达和复制,呈剂量依赖性.在工作浓度为100 nM时,SesiRNA和CesiRNA分别抑制细胞培养上清中75.96%和68.09%的HBsAg,79.69%和78.40%的HBeAg,降低细胞内60%和58%的HBV mRNA,抑制90%和87%的HBV病毒复制中间体.而且SeciRNA对于多种HHsAg自然突变体的表达均有抑制作用.结论:EsiRNA可以有效抑制HBV的基因表达和病毒复制,尤其对于HBV的不同基因型/亚型和准种可以发挥广谱效应.
目的:研究覈痠內切酶製備的siRNA(esiRNA)對HBV基因錶達和複製的抑製作用.方法:利用分子生物學方法製備瞭分彆針對HBV S基因和C基因的esiRNA(SesiRNA、CesiRNA),與HBV複製型質粒pHY106+ wta共轉染HepG2細胞,化學髮光微粒免疫分析方法檢測細胞培養上清中的HBsAg和HBeAg,Northern和Southern印跡檢測HBV的mRNA和病毒複製中間體水平.結果:EsiRNA特異抑製HBV基因錶達和複製,呈劑量依賴性.在工作濃度為100 nM時,SesiRNA和CesiRNA分彆抑製細胞培養上清中75.96%和68.09%的HBsAg,79.69%和78.40%的HBeAg,降低細胞內60%和58%的HBV mRNA,抑製90%和87%的HBV病毒複製中間體.而且SeciRNA對于多種HHsAg自然突變體的錶達均有抑製作用.結論:EsiRNA可以有效抑製HBV的基因錶達和病毒複製,尤其對于HBV的不同基因型/亞型和準種可以髮揮廣譜效應.
목적:연구핵산내절매제비적siRNA(esiRNA)대HBV기인표체화복제적억제작용.방법:이용분자생물학방법제비료분별침대HBV S기인화C기인적esiRNA(SesiRNA、CesiRNA),여HBV복제형질립pHY106+ wta공전염HepG2세포,화학발광미립면역분석방법검측세포배양상청중적HBsAg화HBeAg,Northern화Southern인적검측HBV적mRNA화병독복제중간체수평.결과:EsiRNA특이억제HBV기인표체화복제,정제량의뢰성.재공작농도위100 nM시,SesiRNA화CesiRNA분별억제세포배양상청중75.96%화68.09%적HBsAg,79.69%화78.40%적HBeAg,강저세포내60%화58%적HBV mRNA,억제90%화87%적HBV병독복제중간체.이차SeciRNA대우다충HHsAg자연돌변체적표체균유억제작용.결론:EsiRNA가이유효억제HBV적기인표체화병독복제,우기대우HBV적불동기인형/아형화준충가이발휘엄보효응.