安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
36期
17525-17527
,共3页
贯叶连翘(Hypericum perforatum Linn.)%ISSR-PCR%正交优化
貫葉連翹(Hypericum perforatum Linn.)%ISSR-PCR%正交優化
관협련교(Hypericum perforatum Linn.)%ISSR-PCR%정교우화
[目的]建立贯叶连翘的ISSR-PCR反应体系,并对其条件进行优化.[方法]以贯叶连翘基因组DNA为模板,用L16(45)正交试验设计系统分析引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度、Mg2浓度、dNTP浓度和模板DNA浓度5种因素对贯叶连翘ISSR-PCR反应扩增结果的影响.[结果]正交试验设计的方法可以用于贯叶连翘1SSR-PCR反应体系的建立,经过优化得到贯叶连翘ISSR-PCR反应体系的最佳条件为:20μISSR-PCR反应体系中含10×PCR buffer,Mg2+浓度1.2 mmol/L,Taq DNA聚合酶浓度50 U/ml,DNA浓度20 ng/μl,dNTP浓度250 μmol/L,引物浓度0.75 μmol/L.[结论]试验建立的贯叶连翘的ISSR-PCR反应体系重复性好、分辨率高,结果稳定可靠.
[目的]建立貫葉連翹的ISSR-PCR反應體繫,併對其條件進行優化.[方法]以貫葉連翹基因組DNA為模闆,用L16(45)正交試驗設計繫統分析引物濃度、Taq DNA聚閤酶濃度、Mg2濃度、dNTP濃度和模闆DNA濃度5種因素對貫葉連翹ISSR-PCR反應擴增結果的影響.[結果]正交試驗設計的方法可以用于貫葉連翹1SSR-PCR反應體繫的建立,經過優化得到貫葉連翹ISSR-PCR反應體繫的最佳條件為:20μISSR-PCR反應體繫中含10×PCR buffer,Mg2+濃度1.2 mmol/L,Taq DNA聚閤酶濃度50 U/ml,DNA濃度20 ng/μl,dNTP濃度250 μmol/L,引物濃度0.75 μmol/L.[結論]試驗建立的貫葉連翹的ISSR-PCR反應體繫重複性好、分辨率高,結果穩定可靠.
[목적]건립관협련교적ISSR-PCR반응체계,병대기조건진행우화.[방법]이관협련교기인조DNA위모판,용L16(45)정교시험설계계통분석인물농도、Taq DNA취합매농도、Mg2농도、dNTP농도화모판DNA농도5충인소대관협련교ISSR-PCR반응확증결과적영향.[결과]정교시험설계적방법가이용우관협련교1SSR-PCR반응체계적건립,경과우화득도관협련교ISSR-PCR반응체계적최가조건위:20μISSR-PCR반응체계중함10×PCR buffer,Mg2+농도1.2 mmol/L,Taq DNA취합매농도50 U/ml,DNA농도20 ng/μl,dNTP농도250 μmol/L,인물농도0.75 μmol/L.[결론]시험건립적관협련교적ISSR-PCR반응체계중복성호、분변솔고,결과은정가고.