中国水稻科学
中國水稻科學
중국수도과학
CHINESE JOURNAL OF RICE SCIENCE
2013年
3期
321-324
,共4页
李道恒%马建%王云鹏%马景勇
李道恆%馬建%王雲鵬%馬景勇
리도항%마건%왕운붕%마경용
单引物PCR%未知侧翼序列%转基因水稻
單引物PCR%未知側翼序列%轉基因水稻
단인물PCR%미지측익서렬%전기인수도
确定外源基因在水稻基因组上的插入位置,是转基因水稻研究的重要内容之一.为了建立一种简单、快速、准确的获取外源基因在水稻基因组上插入位置侧翼序列的方法,结合前人TAIL-PCR引物设计的原则和经验,以转入水稻基因组中的Bar基因为锚定基因,设计了既能作为锚定引物又能作为随机引物使用的一系列单引物,应用这些单引物通过单引物PCR成功获得了外源基因在水稻基因组插入位点的侧翼序列.这种方法与目前较为常用的TAIL-PCR相比,简化了70％左右的试验步骤,节省了60％以上的试验时间,是一种简便、快捷的获得未知侧翼序列的方法.
確定外源基因在水稻基因組上的插入位置,是轉基因水稻研究的重要內容之一.為瞭建立一種簡單、快速、準確的穫取外源基因在水稻基因組上插入位置側翼序列的方法,結閤前人TAIL-PCR引物設計的原則和經驗,以轉入水稻基因組中的Bar基因為錨定基因,設計瞭既能作為錨定引物又能作為隨機引物使用的一繫列單引物,應用這些單引物通過單引物PCR成功穫得瞭外源基因在水稻基因組插入位點的側翼序列.這種方法與目前較為常用的TAIL-PCR相比,簡化瞭70％左右的試驗步驟,節省瞭60％以上的試驗時間,是一種簡便、快捷的穫得未知側翼序列的方法.
학정외원기인재수도기인조상적삽입위치,시전기인수도연구적중요내용지일.위료건립일충간단、쾌속、준학적획취외원기인재수도기인조상삽입위치측익서렬적방법,결합전인TAIL-PCR인물설계적원칙화경험,이전입수도기인조중적Bar기인위묘정기인,설계료기능작위묘정인물우능작위수궤인물사용적일계렬단인물,응용저사단인물통과단인물PCR성공획득료외원기인재수도기인조삽입위점적측익서렬.저충방법여목전교위상용적TAIL-PCR상비,간화료70％좌우적시험보취,절성료60％이상적시험시간,시일충간편、쾌첩적획득미지측익서렬적방법.
