复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2013年
3期
314-318,334
,共6页
周莹%张博恒%殷欣%任正刚
週瑩%張博恆%慇訢%任正剛
주형%장박항%은흔%임정강
肝细胞肝癌%缺氧%迁移%侵袭%趋化因子CCL28
肝細胞肝癌%缺氧%遷移%侵襲%趨化因子CCL28
간세포간암%결양%천이%침습%추화인자CCL28
目的 探讨缺氧条件下HCCLM3细胞趋化因子CCL28表达情况及作用.方法 实时定量PCR和ELISA方法检测缺氧条件下肝癌细胞HCCLM3趋化因子CCL28表达水平;运用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和Lipofectamine 2 000细胞转染技术下调CCL28表达;用Transwell和Matrigel观察肝癌细胞HCCLM3侵袭迁移情况;采用明胶酶谱法测定CCL28-siRNA干扰后细胞上清中的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase enzyme,MMP)含量.应用实时定量PCR检测50例肝细胞癌组织中CCL28 mRNA表达情况,运用卡方检验和Kaplan-Meier法分析CCL28表达与临床病例特征及患者总体生存时间的关系.结果 肝癌HCCLM3细胞内CCL28 mRNA在缺氧培养6h后表达增高,蛋白水平在缺氧培养12 h后表达增高,呈时间依赖性.SiRNA抑制CCL28表达后,缺氧条件下HCCLM3细胞迁移数目(65.2±4.49)较siRNA阴性组(85±5.91)和空白组(87.4±8.44)有所减少(P＜0.001);穿过Matrigel膜细胞数目(43.2±5.36)较siRNA阴性组(58±3.87)和对照组(54.6±9.53)有所减少(P=0.011).明胶酶谱法发现CCL28表达抑制后HCCLM3分泌MMP-2减少.PCR结果提示,肝癌组织CCL28 mRNA表达量为0.0254±0.0755,与正常肝组织相比,23例(46％)呈高表达,CCL28表达高低与肿瘤最大径(P=0.027)、术后复发相关(P=0.019);CCL28高表达与低表达组之间总体生存无明显差异(x2=0.008,P=0.927).结论 缺氧条件下趋化因子CCL28高表达并参与肝癌细胞HCCLM3迁移侵袭过程.肝癌组织中CCL28表达增高与术后复发相关.
目的 探討缺氧條件下HCCLM3細胞趨化因子CCL28錶達情況及作用.方法 實時定量PCR和ELISA方法檢測缺氧條件下肝癌細胞HCCLM3趨化因子CCL28錶達水平;運用小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)和Lipofectamine 2 000細胞轉染技術下調CCL28錶達;用Transwell和Matrigel觀察肝癌細胞HCCLM3侵襲遷移情況;採用明膠酶譜法測定CCL28-siRNA榦擾後細胞上清中的基質金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinase enzyme,MMP)含量.應用實時定量PCR檢測50例肝細胞癌組織中CCL28 mRNA錶達情況,運用卡方檢驗和Kaplan-Meier法分析CCL28錶達與臨床病例特徵及患者總體生存時間的關繫.結果 肝癌HCCLM3細胞內CCL28 mRNA在缺氧培養6h後錶達增高,蛋白水平在缺氧培養12 h後錶達增高,呈時間依賴性.SiRNA抑製CCL28錶達後,缺氧條件下HCCLM3細胞遷移數目(65.2±4.49)較siRNA陰性組(85±5.91)和空白組(87.4±8.44)有所減少(P＜0.001);穿過Matrigel膜細胞數目(43.2±5.36)較siRNA陰性組(58±3.87)和對照組(54.6±9.53)有所減少(P=0.011).明膠酶譜法髮現CCL28錶達抑製後HCCLM3分泌MMP-2減少.PCR結果提示,肝癌組織CCL28 mRNA錶達量為0.0254±0.0755,與正常肝組織相比,23例(46％)呈高錶達,CCL28錶達高低與腫瘤最大徑(P=0.027)、術後複髮相關(P=0.019);CCL28高錶達與低錶達組之間總體生存無明顯差異(x2=0.008,P=0.927).結論 缺氧條件下趨化因子CCL28高錶達併參與肝癌細胞HCCLM3遷移侵襲過程.肝癌組織中CCL28錶達增高與術後複髮相關.
목적 탐토결양조건하HCCLM3세포추화인자CCL28표체정황급작용.방법 실시정량PCR화ELISA방법검측결양조건하간암세포HCCLM3추화인자CCL28표체수평;운용소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)화Lipofectamine 2 000세포전염기술하조CCL28표체;용Transwell화Matrigel관찰간암세포HCCLM3침습천이정황;채용명효매보법측정CCL28-siRNA간우후세포상청중적기질금속단백매(matrixmetalloproteinase enzyme,MMP)함량.응용실시정량PCR검측50례간세포암조직중CCL28 mRNA표체정황,운용잡방검험화Kaplan-Meier법분석CCL28표체여림상병례특정급환자총체생존시간적관계.결과 간암HCCLM3세포내CCL28 mRNA재결양배양6h후표체증고,단백수평재결양배양12 h후표체증고,정시간의뢰성.SiRNA억제CCL28표체후,결양조건하HCCLM3세포천이수목(65.2±4.49)교siRNA음성조(85±5.91)화공백조(87.4±8.44)유소감소(P＜0.001);천과Matrigel막세포수목(43.2±5.36)교siRNA음성조(58±3.87)화대조조(54.6±9.53)유소감소(P=0.011).명효매보법발현CCL28표체억제후HCCLM3분비MMP-2감소.PCR결과제시,간암조직CCL28 mRNA표체량위0.0254±0.0755,여정상간조직상비,23례(46％)정고표체,CCL28표체고저여종류최대경(P=0.027)、술후복발상관(P=0.019);CCL28고표체여저표체조지간총체생존무명현차이(x2=0.008,P=0.927).결론 결양조건하추화인자CCL28고표체병삼여간암세포HCCLM3천이침습과정.간암조직중CCL28표체증고여술후복발상관.
