中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2013年
5期
227-232
,共6页
汪龙强%雷哲%刘霞%刘仍允%张洪涛
汪龍彊%雷哲%劉霞%劉仍允%張洪濤
왕룡강%뢰철%류하%류잉윤%장홍도
肺肿瘤%TIF1γ%甲基化%Bisulfite-sequencing PCR
肺腫瘤%TIF1γ%甲基化%Bisulfite-sequencing PCR
폐종류%TIF1γ%갑기화%Bisulfite-sequencing PCR
背景与目的 TIF1γ(transcription intermediary factor 1 gamma)属于转录中介因子1家族的成员,可干扰TGF-β/Smad信号通路,抑制TGF-β介导的信号传导,且TIF1γ在多种肿瘤细胞的表达减弱或缺失表明TIF1γ在癌症的发生发展过程中起到抑癌的作用.本研究旨在探索TIF1γ在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞与组织中的表达差异以确定TIF1γ与肺癌发生关系以及肺癌细胞中TIF1γ表达调控的潜在机制.方法 选取13例NSCLC患者癌组织以及对应的癌旁组织样本,培养正常支气管上皮细胞HBE和NSCLC细胞株:A549和95C.运用Real-time PCR和Western blot检测细胞与组织中TIF1γ基因的表达,并用ImageJ灰度扫描软件计算TIF1γ的相对表达量.通过DNA测序的方法检测TIF1γ基因启动子区域突变情况,并采用Bisulfite-sequencing PCR(BSP)克隆测序方法检测TIF1γ 基因启动子区域甲基化情况.结果 相对于HBE,TIF1γ mRNA和蛋白在A549和95C中明显下调(P＜o.05),13对组织样本中,9个(69.2％)癌旁组织样本里TIF1γ mRNA的表达量高于癌组织样本(P＜0.05).突变检测表明TIF1γ基因启动子区-287-5在细胞株中没有突变发生.经BSP克隆测序方法分析发现在TIF1基因启动子-287-5区域里存在5个可被甲基化的CpG位点(-214、-128、-124、-65和-55).但这些CpG位点的甲基化频率在NSCLC细胞株中相比HBE没有明显差异.结论 TIF1γ在NSCLC的发生中可能起抑癌的作用,TIF1γ基因启动子区域-287-5在正常细胞和NSCLC细胞中都没有发生突变,但在-287-5区域中存在5个可被甲基化的CpG位点.
揹景與目的 TIF1γ(transcription intermediary factor 1 gamma)屬于轉錄中介因子1傢族的成員,可榦擾TGF-β/Smad信號通路,抑製TGF-β介導的信號傳導,且TIF1γ在多種腫瘤細胞的錶達減弱或缺失錶明TIF1γ在癌癥的髮生髮展過程中起到抑癌的作用.本研究旨在探索TIF1γ在非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)細胞與組織中的錶達差異以確定TIF1γ與肺癌髮生關繫以及肺癌細胞中TIF1γ錶達調控的潛在機製.方法 選取13例NSCLC患者癌組織以及對應的癌徬組織樣本,培養正常支氣管上皮細胞HBE和NSCLC細胞株:A549和95C.運用Real-time PCR和Western blot檢測細胞與組織中TIF1γ基因的錶達,併用ImageJ灰度掃描軟件計算TIF1γ的相對錶達量.通過DNA測序的方法檢測TIF1γ基因啟動子區域突變情況,併採用Bisulfite-sequencing PCR(BSP)剋隆測序方法檢測TIF1γ 基因啟動子區域甲基化情況.結果 相對于HBE,TIF1γ mRNA和蛋白在A549和95C中明顯下調(P＜o.05),13對組織樣本中,9箇(69.2％)癌徬組織樣本裏TIF1γ mRNA的錶達量高于癌組織樣本(P＜0.05).突變檢測錶明TIF1γ基因啟動子區-287-5在細胞株中沒有突變髮生.經BSP剋隆測序方法分析髮現在TIF1基因啟動子-287-5區域裏存在5箇可被甲基化的CpG位點(-214、-128、-124、-65和-55).但這些CpG位點的甲基化頻率在NSCLC細胞株中相比HBE沒有明顯差異.結論 TIF1γ在NSCLC的髮生中可能起抑癌的作用,TIF1γ基因啟動子區域-287-5在正常細胞和NSCLC細胞中都沒有髮生突變,但在-287-5區域中存在5箇可被甲基化的CpG位點.
배경여목적 TIF1γ(transcription intermediary factor 1 gamma)속우전록중개인자1가족적성원,가간우TGF-β/Smad신호통로,억제TGF-β개도적신호전도,차TIF1γ재다충종류세포적표체감약혹결실표명TIF1γ재암증적발생발전과정중기도억암적작용.본연구지재탐색TIF1γ재비소세포폐암(non-small cell lung cancer,NSCLC)세포여조직중적표체차이이학정TIF1γ여폐암발생관계이급폐암세포중TIF1γ표체조공적잠재궤제.방법 선취13례NSCLC환자암조직이급대응적암방조직양본,배양정상지기관상피세포HBE화NSCLC세포주:A549화95C.운용Real-time PCR화Western blot검측세포여조직중TIF1γ기인적표체,병용ImageJ회도소묘연건계산TIF1γ적상대표체량.통과DNA측서적방법검측TIF1γ기인계동자구역돌변정황,병채용Bisulfite-sequencing PCR(BSP)극륭측서방법검측TIF1γ 기인계동자구역갑기화정황.결과 상대우HBE,TIF1γ mRNA화단백재A549화95C중명현하조(P＜o.05),13대조직양본중,9개(69.2％)암방조직양본리TIF1γ mRNA적표체량고우암조직양본(P＜0.05).돌변검측표명TIF1γ기인계동자구-287-5재세포주중몰유돌변발생.경BSP극륭측서방법분석발현재TIF1기인계동자-287-5구역리존재5개가피갑기화적CpG위점(-214、-128、-124、-65화-55).단저사CpG위점적갑기화빈솔재NSCLC세포주중상비HBE몰유명현차이.결론 TIF1γ재NSCLC적발생중가능기억암적작용,TIF1γ기인계동자구역-287-5재정상세포화NSCLC세포중도몰유발생돌변,단재-287-5구역중존재5개가피갑기화적CpG위점.
