高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2013年
5期
1115-1120
,共6页
唐吉军%徐华%陈佳%郭磊%谢剑炜
唐吉軍%徐華%陳佳%郭磊%謝劍煒
당길군%서화%진가%곽뢰%사검위
适配体%微磁珠分离%实时定量聚合酶链式反应%凝血酶%ATP
適配體%微磁珠分離%實時定量聚閤酶鏈式反應%凝血酶%ATP
괄배체%미자주분리%실시정량취합매련식반응%응혈매%ATP
利用适配体的识别能力和可扩增性,构建了基于微磁珠分离技术的适配体实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法.通过微磁珠偶联的互补链与适配体序列之间的碱基配对结合,有效除去溶液中未与靶分子结合的适配体序列,采用实时定量PCR技术测定上清液中结合态的适配体序列浓度,从而间接实现对靶分子的定量检测.分别选取代表生物大分子和有机小分子的凝血酶和ATP作为检测对象,验证了该方法的普适性.研究结果表明,在获取特异性适配体序列后,仅需简单优化其互补链序列,即可对超低含量的凝血酶和ATP进行准确定量,检出限分别为50 pmol/L和5μmol/L.该方法具有同时适用于高特异性和高灵敏度地检测生物大分子和有机小分子的优势.
利用適配體的識彆能力和可擴增性,構建瞭基于微磁珠分離技術的適配體實時定量聚閤酶鏈式反應(PCR)檢測方法.通過微磁珠偶聯的互補鏈與適配體序列之間的堿基配對結閤,有效除去溶液中未與靶分子結閤的適配體序列,採用實時定量PCR技術測定上清液中結閤態的適配體序列濃度,從而間接實現對靶分子的定量檢測.分彆選取代錶生物大分子和有機小分子的凝血酶和ATP作為檢測對象,驗證瞭該方法的普適性.研究結果錶明,在穫取特異性適配體序列後,僅需簡單優化其互補鏈序列,即可對超低含量的凝血酶和ATP進行準確定量,檢齣限分彆為50 pmol/L和5μmol/L.該方法具有同時適用于高特異性和高靈敏度地檢測生物大分子和有機小分子的優勢.
이용괄배체적식별능력화가확증성,구건료기우미자주분리기술적괄배체실시정량취합매련식반응(PCR)검측방법.통과미자주우련적호보련여괄배체서렬지간적감기배대결합,유효제거용액중미여파분자결합적괄배체서렬,채용실시정량PCR기술측정상청액중결합태적괄배체서렬농도,종이간접실현대파분자적정량검측.분별선취대표생물대분자화유궤소분자적응혈매화ATP작위검측대상,험증료해방법적보괄성.연구결과표명,재획취특이성괄배체서렬후,부수간단우화기호보련서렬,즉가대초저함량적응혈매화ATP진행준학정량,검출한분별위50 pmol/L화5μmol/L.해방법구유동시괄용우고특이성화고령민도지검측생물대분자화유궤소분자적우세.
