分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2012年
12期
1827-1831
,共5页
雷兆静%张存政%胡秋辉%刘媛%张强%刘贤金
雷兆靜%張存政%鬍鞦輝%劉媛%張彊%劉賢金
뢰조정%장존정%호추휘%류원%장강%류현금
核酸适体%荧光%汞离子%检测
覈痠適體%熒光%汞離子%檢測
핵산괄체%형광%홍리자%검측
通过对已知的Ni2+适体的改造,发现了对Hg2+有较强结合活性的核酸适体N1,基于N1的二级结构进行改造,获得了具有较高活性的核酸适体N5,并建立了荧光检测方法.以荧光基团FAM标记核酸适体,在94℃变性5 min,室温(25℃)下复性30 min后,适配体与标记有荧光猝灭基团DABCYL的一段互补序列Q2结合(适体与Q2的浓度比为1∶3),加入系列浓度的Hg2+与互补序列竞争结合核酸适体,以荧光信号的变化定量分析Hg2+浓度.结果表明,N1与Hg2+结合呈线性,线性范围为1.25~20 mg/L;检出限为0.62 mg/L;以N1结构为基础改造合成的序列和结构均不同的适体N4,N5,N6,N7对Hg2+的识别结合活性均不同,其中适体N5与Hg2+结合活性最为灵敏,特异性高,线性范围为0.156~2.50 mg/L;检出限为78 μg/L.
通過對已知的Ni2+適體的改造,髮現瞭對Hg2+有較彊結閤活性的覈痠適體N1,基于N1的二級結構進行改造,穫得瞭具有較高活性的覈痠適體N5,併建立瞭熒光檢測方法.以熒光基糰FAM標記覈痠適體,在94℃變性5 min,室溫(25℃)下複性30 min後,適配體與標記有熒光猝滅基糰DABCYL的一段互補序列Q2結閤(適體與Q2的濃度比為1∶3),加入繫列濃度的Hg2+與互補序列競爭結閤覈痠適體,以熒光信號的變化定量分析Hg2+濃度.結果錶明,N1與Hg2+結閤呈線性,線性範圍為1.25~20 mg/L;檢齣限為0.62 mg/L;以N1結構為基礎改造閤成的序列和結構均不同的適體N4,N5,N6,N7對Hg2+的識彆結閤活性均不同,其中適體N5與Hg2+結閤活性最為靈敏,特異性高,線性範圍為0.156~2.50 mg/L;檢齣限為78 μg/L.
통과대이지적Ni2+괄체적개조,발현료대Hg2+유교강결합활성적핵산괄체N1,기우N1적이급결구진행개조,획득료구유교고활성적핵산괄체N5,병건립료형광검측방법.이형광기단FAM표기핵산괄체,재94℃변성5 min,실온(25℃)하복성30 min후,괄배체여표기유형광졸멸기단DABCYL적일단호보서렬Q2결합(괄체여Q2적농도비위1∶3),가입계렬농도적Hg2+여호보서렬경쟁결합핵산괄체,이형광신호적변화정량분석Hg2+농도.결과표명,N1여Hg2+결합정선성,선성범위위1.25~20 mg/L;검출한위0.62 mg/L;이N1결구위기출개조합성적서렬화결구균불동적괄체N4,N5,N6,N7대Hg2+적식별결합활성균불동,기중괄체N5여Hg2+결합활성최위령민,특이성고,선성범위위0.156~2.50 mg/L;검출한위78 μg/L.