激光杂志
激光雜誌
격광잡지
LASER JOURNAL
2013年
1期
98-99,101
,共3页
黄开顺%黄天利%葛璞%叶彬
黃開順%黃天利%葛璞%葉彬
황개순%황천리%갈박%협빈
刚地弓形虫%肝癌细胞HepG2%细胞凋亡%细胞内钙离子浓度%半胱氨酸蛋白酶-3
剛地弓形蟲%肝癌細胞HepG2%細胞凋亡%細胞內鈣離子濃度%半胱氨痠蛋白酶-3
강지궁형충%간암세포HepG2%세포조망%세포내개리자농도%반광안산단백매-3
目的:研究刚地弓形虫RH株培养上清对体外培养的肝癌细胞HepG2增值的影响,并探讨其可能的影响机制.方法:取对数生长期的HepG2细胞,分别接种于96孔细胞培养板及50mL培养瓶中,加入200μL不同数量(3×107/mL、6×107/mL、12×107/mL)弓形虫RH株速殖子培养上清孵育24、48、36、72h后,四甲基氮噻唑蓝(MTT)法检测其对HepG2细胞增殖抑制作用；不同浓度弓形虫培养上清作用HepG2细胞48h后,DAPI染色,荧光显微镜观察细胞核形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞内钙离子浓度([Ca2+]i),Western-blot检测凋亡HePG2细胞内Caspase-3的表达.结果弓形虫培养上清能抑制HepG2细胞株增殖和诱导其凋亡,且呈时间剂量依赖性,各实验组与对照组比较有统计学意义(P＜0.05);HepG2细胞凋亡率和[Ca2+]i随浓度增加逐渐增加,12×107/mL时凋亡率和[Ca2+]i分别达到41.46％、128.4(荧光计数单位)；Caspase-3的表达随上清浓度增加表达增强.结论:刚地弓形虫培养上清能够抑制肝癌HepG2细胞增殖,其诱导HepG2细胞凋亡可能与细胞内钙离子浓度上调和Caspase-3的表达增强相关.
目的:研究剛地弓形蟲RH株培養上清對體外培養的肝癌細胞HepG2增值的影響,併探討其可能的影響機製.方法:取對數生長期的HepG2細胞,分彆接種于96孔細胞培養闆及50mL培養瓶中,加入200μL不同數量(3×107/mL、6×107/mL、12×107/mL)弓形蟲RH株速殖子培養上清孵育24、48、36、72h後,四甲基氮噻唑藍(MTT)法檢測其對HepG2細胞增殖抑製作用；不同濃度弓形蟲培養上清作用HepG2細胞48h後,DAPI染色,熒光顯微鏡觀察細胞覈形態變化,流式細胞儀檢測細胞凋亡率和細胞內鈣離子濃度([Ca2+]i),Western-blot檢測凋亡HePG2細胞內Caspase-3的錶達.結果弓形蟲培養上清能抑製HepG2細胞株增殖和誘導其凋亡,且呈時間劑量依賴性,各實驗組與對照組比較有統計學意義(P＜0.05);HepG2細胞凋亡率和[Ca2+]i隨濃度增加逐漸增加,12×107/mL時凋亡率和[Ca2+]i分彆達到41.46％、128.4(熒光計數單位)；Caspase-3的錶達隨上清濃度增加錶達增彊.結論:剛地弓形蟲培養上清能夠抑製肝癌HepG2細胞增殖,其誘導HepG2細胞凋亡可能與細胞內鈣離子濃度上調和Caspase-3的錶達增彊相關.
목적:연구강지궁형충RH주배양상청대체외배양적간암세포HepG2증치적영향,병탐토기가능적영향궤제.방법:취대수생장기적HepG2세포,분별접충우96공세포배양판급50mL배양병중,가입200μL불동수량(3×107/mL、6×107/mL、12×107/mL)궁형충RH주속식자배양상청부육24、48、36、72h후,사갑기담새서람(MTT)법검측기대HepG2세포증식억제작용；불동농도궁형충배양상청작용HepG2세포48h후,DAPI염색,형광현미경관찰세포핵형태변화,류식세포의검측세포조망솔화세포내개리자농도([Ca2+]i),Western-blot검측조망HePG2세포내Caspase-3적표체.결과궁형충배양상청능억제HepG2세포주증식화유도기조망,차정시간제량의뢰성,각실험조여대조조비교유통계학의의(P＜0.05);HepG2세포조망솔화[Ca2+]i수농도증가축점증가,12×107/mL시조망솔화[Ca2+]i분별체도41.46％、128.4(형광계수단위)；Caspase-3적표체수상청농도증가표체증강.결론:강지궁형충배양상청능구억제간암HepG2세포증식,기유도HepG2세포조망가능여세포내개리자농도상조화Caspase-3적표체증강상관.
