CAJ | 학술논문

目的:探讨蛇床子素对体外培养的大鼠成骨细胞增殖的影响及机制.方法:新生SD大鼠10只,脱颈处死后取出颅盖骨,剪成约1 mm×1 mm的碎片,采用胰酶预消化15 min,继以0.1％Ⅰ型胶原酶37℃消化2次,每次1h,所得细胞混匀后置于5％ CO2培养箱中37℃恒温培养.细胞培养48 h、28 d后行ALP染色和矿化结节染色以进行成骨性鉴定.细胞随机分为5组,分别加入终浓度为100、50、25、12.5、0μmol/L的蛇床子素进行干预.24、48、72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖率,并通过Western Blot方法检测加药1周后PCNA、β-catenin蛋白表达量.结果:镜下观察细胞形态不规则,具有典型的成骨细胞形态；ALP染色及矿化结节染色均为阳性.CCK-8检测发现100 μmol/L的蛇床子素干预24 h后即可抑制成骨细胞生长,50 μmol/L和25μmol/L的蛇床子素于加药后48 h开始抑制成骨细胞生长,12.5 μmol/L蛇床子素对成骨细胞的增殖无显著影响.Western Blot检测结果显示PCNA及β-catenin随蛇床子素浓度增加而表达下调.结论:100、50、25 μmoL/L各个浓度的蛇床子素可抑制成骨细胞增殖,12.5μmol/L蛇床子素对细胞的增殖特性无显著影响.蛇床子素抑制成骨细胞增殖的作用可能是通过干扰Wnt/β-catenin信号通路而实现的.
목적:탐토사상자소대체외배양적대서성골세포증식적영향급궤제.방법:신생SD대서10지,탈경처사후취출로개골,전성약1 mm×1 mm적쇄편,채용이매예소화15 min,계이0.1％Ⅰ형효원매37℃소화2차,매차1h,소득세포혼균후치우5％ CO2배양상중37℃항온배양.세포배양48 h、28 d후행ALP염색화광화결절염색이진행성골성감정.세포수궤분위5조,분별가입종농도위100、50、25、12.5、0μmol/L적사상자소진행간예.24、48、72 h후채용CCK-8법검측세포증식솔,병통과Western Blot방법검측가약1주후PCNA、β-catenin단백표체량.결과:경하관찰세포형태불규칙,구유전형적성골세포형태；ALP염색급광화결절염색균위양성.CCK-8검측발현100 μmol/L적사상자소간예24 h후즉가억제성골세포생장,50 μmol/L화25μmol/L적사상자소우가약후48 h개시억제성골세포생장,12.5 μmol/L사상자소대성골세포적증식무현저영향.Western Blot검측결과현시PCNA급β-catenin수사상자소농도증가이표체하조.결론:100、50、25 μmoL/L각개농도적사상자소가억제성골세포증식,12.5μmol/L사상자소대세포적증식특성무현저영향.사상자소억제성골세포증식적작용가능시통과간우Wnt/β-catenin신호통로이실현적.